Prejsť na obsah
Ohyb.3
Tkanivo
Mozog, mozgová kôra
Choroba
Endotelióm
Synonymá
bEND.3, b.End3, bEnd.3, bEnd3, BEND3, brain-derived Endothelial cells.3

Dokumenty

Ohyb.3

Cell line · Číslo výrobku 305265

€430.00bez DPH a poštovného
Na objednávku
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia Bend.3 je odvodená z endotelových buniek myšieho mozgu a je široko využívaná v neurovaskulárnom výskume. Tieto bunky slúžia ako model na štúdium hematoencefalickej bariéry (BBB), kritickej štruktúry, ktorá reguluje prestup látok z krvného obehu do mozgu. Bunky Bend.3 sú dôležité pri skúmaní molekulárnych a bunkových mechanizmov, ktoré riadia integritu, priepustnosť a transportné funkcie BBB. Výskumníci používajú bunky Bend.3 na skúmanie patofyziológie rôznych neurologických porúch, ako je napríklad mŕtvica, Alzheimerova choroba a skleróza multiplex, pri ktorých je dysfunkcia BBB charakteristická.

Bunky Bend.3 vykazujú vlastnosti endotelu vrátane expresie proteínov tesného spojenia, ako sú okludín, klaudíny a zonula occludens-1 (ZO-1), ktoré sú nevyhnutné na udržanie selektívnej priepustnosti BBB. Exprimujú aj markery ako CD31 a von Willebrandov faktor, ktoré sú typické pre endotelové bunky. Bunky Bend.3 reagujú na zápalové podnety a oxidačný stres, vďaka čomu sú vhodné na štúdium narušenia BBB a neurozápalu. Okrem toho sa táto bunková línia používa na hodnotenie účinnosti a bezpečnosti farmakologických látok určených na prestup cez BBB, čo pomáha pri vývoji liečby porúch centrálneho nervového systému. Užitočnosť buniek Bend.3 pri modelovaní neurovaskulárnej jednotky podčiarkuje ich dôležitosť pri zlepšovaní nášho chápania biológie mozgových endotelových buniek a pri vývoji neuroterapeutík.

Tkanivo
Mozog, mozgová kôra
Choroba
Endotelióm
Synonymá
  • bEND.3
  • b.End3
  • bEnd.3
  • bEnd3
  • BEND3
  • brain-derived Endothelial cells.3

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Nešpecifikované
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This murine endothelial cell line (bEnd.3) contains a polyomavirus middle T antigen encoded by the NTKmT retroviral vector, driving transformation and enhanced proliferation. The construct is stably present in brain microvascular endothelial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Endotel
Typ bunky
Endotelová bunka

04Identifikátory

Citácia
Bend.3 (katalógové číslo Cytion 305265)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0170

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
ICAM-1 +, VCAM-1 +, MAdCAM-1 +
Vírusy
Transformant: Murine polyomavirus (kmeň A2) (MPyV) stredný T antigén (PyMT)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
BALB/c
Vek darcu
6 týždňov

10Podrobnosti o produkte

Tabuľka zloženia