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Cellules HCT-8 (HRT-18)
Tissue
Rectum
Disease
Adénocarcinome
Synonyms
HCT 8, HCT8

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Cellules HCT-8 (HRT-18)

Cell line · Product number 300210

HCT-8 cells, also known as human ileocecal colorectal adenocarcinoma cells, are an epithelial cell line originally derived from a 67-year-old Caucasian ma...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Les cellules HCT-8, également connues sous le nom de cellules d’adénocarcinome colorectal iléo-cæcal humain, constituent une lignée cellulaire épithéliale initialement dérivée d’un patient de sexe masculin, de race caucasienne, âgé de 67 ans, atteint d’un adénocarcinome iléo-cæcal. La lignée cellulaire HCT-8 a été établie à la fin des années 1960 et est largement utilisée dans la recherche sur le cancer, en particulier dans l’étude de la pathogenèse du cancer colorectal, des métastases et de la réponse au traitement.

Sur le plan morphologique, les cellules HCT-8 sont de type épithélial et présentent un mode de croissance en monocouche avec une forme polygonale. Elles sont capables de se développer aussi bien en culture adhérente qu’en culture semi-suspendue, ce qui est caractéristique de certains stades de transition de la métastase des cellules cancéreuses. Cette caractéristique les rend particulièrement utiles pour les études liées à l’invasion et à la migration des cellules cancéreuses.

Sur le plan génotypique, les cellules HCT-8 sont hypertriploïdes et présentent plusieurs aberrations chromosomiques courantes dans les carcinomes colorectaux, notamment des mutations et des délétions liées à la progression du cancer et aux mécanismes de résistance. Ce profil génétique justifie leur utilisation dans les études oncologiques, en particulier celles axées sur les voies génétiques impliquées dans la tumorigenèse et la résistance aux médicaments.

Les recherches menées à l’aide des cellules HCT-8 ont considérablement contribué à la compréhension de la biologie du cancer colorectal, notamment en élucidant les voies moléculaires impliquées dans la prolifération des cellules cancéreuses, l’apoptose et la chimiorésistance. Cette lignée cellulaire demeure un modèle essentiel pour évaluer l’efficacité de nouveaux agents thérapeutiques et pour explorer les mécanismes moléculaires sous-jacents au cancer colorectal.

Tissue
Rectum
Disease
Adénocarcinome
Synonyms
  • HCT 8
  • HCT8

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type épithélial
Tumourigenic
Chez les souris nues
Doubling time
15 heures

04Identifiers

Citation
HCT-8 (numéro de catalogue Cytion 300210)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CDx (+/-), CDy (-),
Isoenzymes
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutational profile
Les cellules HRT-18 présentent une mutation au codon 13 du gène Kras : GGC (Wt Gly) > GAC (Asp)
Viruses
Négatif à la transcriptase inverse
Products
Antigène carcino-embryonnaire (ACE) 0,5 ng/10⁶ cellules/10 jours, phosphatase alcaline, kératine

06Handling and culture

Culture medium
DMEM : F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d’HEPES, 0,5 mM de pyruvate de sodium, 1,2 g/L de NaHCO₃ (référence Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
de 2 à 4 × 10⁴ cellules/cm²
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Rapide
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
67 ans