Mine otse sisu juurde
HCT-8 (HRT-18) rakud
Kude
Rektum
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
HCT 8, HCT8

Dokumendid

HCT-8 (HRT-18) rakud

Cell line · Toote number 300210

HCT-8-rakud, mida tuntakse ka inimese ileotsekaalse kolorektaalse adenokartsinoomi rakkudena, on epiteelrakkude liin, mis on algselt saadud 67-aastaselt valgenahalise mehelt...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCT-8 rakud, mida tuntakse ka inimese ileotsiaalse kolorektaalse adenokartsinoomi rakkude nime all, on epiteelirakuliin, mis on algselt saadud 67-aastase kaukaasia meessoost patsiendi ileotsiaalse adenokartsinoomiga. HCT-8 rakuliin loodi 1960. aastate lõpus ja seda kasutatakse laialdaselt vähiuuringutes, eelkõige kolorektaalvähi patogeneesi, metastaaside tekke ja ravivastuse uurimisel.

Morfoloogiliselt on HCT-8 rakud epiteelilaadsed ja neil on monokihiline kasvumuster, millel on hulknurkne kuju. Neil on võime kasvada nii adherentsetes kui ka poolsuspendeeritud kultuurides, mis on iseloomulik mõnele vähirakkude metastaasi üleminekustaadiumile. See omadus muudab nad eriti kasulikuks vähirakkude invasiooni ja migratsiooni uuringutes.

Geenitüübilt on HCT-8 rakud hüpertriploidsed, sisaldades mitmeid kromosoomaberratsioone, mis on levinud kolorektaalkartsinoomides, sealhulgas mutatsioonid ja deletsioonid, mis on olulised vähi progresseerumise ja resistentsuse mehhanismide seisukohast. Selline geneetiline profiil toetab nende kasutamist onkoloogilistes uuringutes, eriti nendes, mis keskenduvad kasvajate tekke ja ravimiresistentsuse geneetilistele radadele.

HCT-8 rakke kasutavad uuringud on oluliselt kaasa aidanud kolorektaalvähi bioloogia mõistmisele, sealhulgas vähirakkude proliferatsiooni, apoptoosi ja kemoresistentsusega seotud molekulaarradade selgitamisele. See rakuliin on jätkuvalt oluline mudel uute raviainete tõhususe uurimiseks ja kolorektaalvähi aluseks olevate molekulaarsete mehhanismide uurimiseks.

Kude
Rektum
Haigus
Adenokartsinoom
Sünonüümid
  • HCT 8
  • HCT8

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Alasti hiirtel
Kahekordistumisaeg
15 tundi

04Tunnused

Viide
HCT-8 (Cytioni katalooginumber 300210)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
CDx (+/-), CDy (-),
Isoensüümid
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutatsiooniprofiil
HRT-18 rakud kannavad mutatsiooni Kras'i geeni 13. koodonis: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Viirused
Reverse transkriptaasi negatiivne
Tooted
Kartsiinoembüooniline antigeen (CEA) 0,5 ng/10 exp6 rakku/10 päeva, leeliseline fosfataas, keratiin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 kuni 4 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Kiire
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
67 aastat