Prejsť na obsah
Bunky HCT-8 (HRT-18)
Tkanivo
Konečník
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
HCT 8, HCT8

Dokumenty

Bunky HCT-8 (HRT-18)

Cell line · Číslo výrobku 300210

Bunky HCT-8, známe aj ako bunky ľudského ileocekálneho kolorektálneho adenokarcinómu, sú epiteliálna bunková línia pôvodne izolovaná z 67-ročného muža kaukazského pôvodu...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky HCT-8, známe aj ako bunky ľudského ileocekálneho kolorektálneho adenokarcinómu, sú epitelovou bunkovou líniou pôvodne získanou od 67-ročného muža kaukazskej rasy s ileocekálnym adenokarcinómom. Bunková línia HCT-8 bola vytvorená koncom 60. rokov 20. storočia a je široko využívaná vo výskume rakoviny, najmä pri štúdiu patogenézy kolorektálneho karcinómu, metastázovania a odpovede na liečbu.

Morfologicky sú bunky HCT-8 podobné epitelovým a vykazujú jednovrstvový rastový vzor s polygonálnym tvarom. Majú schopnosť rásť v adherentných aj polosuspendovaných kultúrach, čo je charakteristické pre niektoré prechodné štádiá metastázovania rakovinových buniek. Táto vlastnosť ich robí obzvlášť užitočnými pre štúdie týkajúce sa invázie a migrácie rakovinových buniek.

Genotypovo sú bunky HCT-8 hypertriploidné a obsahujú niekoľko chromozómových aberácií bežných pre kolorektálne karcinómy vrátane mutácií a delécií, ktoré sú dôležité pre progresiu rakoviny a mechanizmy rezistencie. Tento genetický profil podporuje ich použitie v onkologických štúdiách, najmä v tých, ktoré sa zameriavajú na genetické dráhy zapojené do nádorového bujnenia a rezistencie na lieky.

Výskum využívajúci bunky HCT-8 významne prispel k pochopeniu biológie kolorektálneho karcinómu vrátane objasnenia molekulárnych dráh zapojených do proliferácie rakovinových buniek, apoptózy a chemorezistencie. Táto bunková línia je naďalej rozhodujúcim modelom na skúmanie účinnosti nových terapeutických látok a na skúmanie molekulárnych mechanizmov, ktoré sú základom kolorektálneho karcinómu.

Tkanivo
Konečník
Choroba
Adenokarcinóm
Synonymá
  • HCT 8
  • HCT8

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Na nahých myšiach
Doba zdvojnásobenia
15 hodín

04Identifikátory

Citácia
HCT-8 (katalógové číslo Cytion 300210)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
CDx (+/-), CDy (-),
Izoenzýmy
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutčný profil
Bunky HRT-18 nesú mutáciu v kodóne 13 génu Kras: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Vírusy
Reverzná transkriptáza negatívna
Produkty
Karcinoembryonálny antigén (CEA) 0,5 ng/10 exp6 buniek/10 dní, alkalická fosfatáza, keratín

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
2 až 4 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Rýchle
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
67 rokov