Gå direkt till innehållet
HCT-8 (HRT-18) celler
Vävnad
Rektum
Sjukdom
Adenocarcinom
Synonymer
HCT 8, HCT8

HCT-8 (HRT-18) celler

Cell line · Produktnummer 300210

HCT-8-celler, även kända som humana adenokarcinomceller från ileocecal-området i tjocktarmen, är en epitelcellinje som ursprungligen härstammar från en 67-årig kaukasisk man...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HCT-8-celler, även kända som humana ileocecala kolorektala adenocarcinomceller, är en epitelcellinje som ursprungligen härrör från en 67-årig kaukasisk manlig patient med ileocecalt adenocarcinom. HCT-8-cellinjen etablerades i slutet av 1960-talet och används i stor utsträckning inom cancerforskning, särskilt för att studera patogenes, metastasering och behandlingssvar vid kolorektal cancer.

Morfologiskt är HCT-8-cellerna epitelliknande och uppvisar ett tillväxtmönster i monolager med polygonal form. De har förmågan att växa i både vidhäftande och halvsuspenderade kulturer, vilket är karakteristiskt för vissa övergångsstadier av cancercellsmetastasering. Denna egenskap gör dem särskilt användbara för studier relaterade till invasion och migration av cancerceller.

Genotypiskt sett är HCT-8-cellerna hypertriploida och innehåller flera kromosomavvikelser som är vanliga i kolorektala karcinom, inklusive mutationer och deletioner som är relevanta för cancerprogression och resistensmekanismer. Denna genetiska profil stöder deras användning i onkologiska studier, särskilt sådana som fokuserar på genetiska vägar som är involverade i tumörutveckling och läkemedelsresistens.

Forskning med HCT-8-celler har bidragit väsentligt till förståelsen av biologin bakom kolorektal cancer, bland annat genom att klarlägga molekylära vägar som är involverade i cancercellers proliferation, apoptos och kemoresistens. Cellinjen fortsätter att vara en viktig modell för att undersöka effekten av nya terapeutiska medel och för att utforska de molekylära mekanismer som ligger bakom kolorektal cancer.

Vävnad
Rektum
Sjukdom
Adenocarcinom
Synonymer
  • HCT 8
  • HCT8

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
I nakna möss
Fördubblingstid
15 timmar

04Identifierare

Källa
HCT-8 (Cytion katalognummer 300210)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Uttryck och mottaglighet

Antigenuttryck
CDx (+/-), CDy (-),
Isoenzymer
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutationsprofil
HRT-18-cellerna bär på en mutation i kodon 13 i Kras-genen: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Virus
Omvänt transkriptas negativt
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 0,5 ng/10 exp6 celler/10 dagar, alkaliskt fosfatas, keratin

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2 till 4 x 104 celler/cm2
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Snabb
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
67 år