Ga naar de inhoud
HCT-8 (HRT-18) cellen
Weefsel
Rectum
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
HCT 8, HCT8

Documenten

HCT-8 (HRT-18) cellen

Cell line · Productnummer 300210

HCT-8-cellen, ook wel bekend als menselijke ileocecale colorectale adenocarcinoomcellen, zijn een epitheelcellijn die oorspronkelijk is afgeleid van een 67-jarige blanke man...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

HCT-8 cellen, ook bekend als humane ileocecale colorectale adenocarcinomacellen, zijn een epitheliale cellijn die oorspronkelijk afkomstig is van een 67-jarige Kaukasische mannelijke patiënt met ileocecaal adenocarcinoom. De HCT-8 cellijn werd eind jaren zestig ontwikkeld en wordt veel gebruikt voor kankeronderzoek, met name voor het bestuderen van de pathogenese van colorectale kanker, metastase en de respons op behandelingen.

Morfologisch zijn HCT-8 cellen epitheelachtig en vertonen ze een monolaag groeipatroon met een polygonale vorm. Ze kunnen zowel in aanhangende als in half gesuspendeerde culturen groeien, wat kenmerkend is voor sommige overgangsstadia van kankercelmetastase. Deze eigenschap maakt ze bijzonder nuttig voor studies met betrekking tot de invasie en migratie van kankercellen.

Genotypisch zijn HCT-8 cellen hypertriploïd en bevatten ze verschillende chromosoomafwijkingen die veel voorkomen bij colorectale carcinomen, waaronder mutaties en deleties die relevant zijn voor de progressie van kanker en resistentiemechanismen. Dit genetische profiel ondersteunt hun gebruik in oncologische studies, met name studies die zich richten op genetische routes die betrokken zijn bij tumorigenese en resistentie tegen geneesmiddelen.

Onderzoek met HCT-8 cellen heeft aanzienlijk bijgedragen aan het begrip van colorectale kankerbiologie, inclusief de opheldering van moleculaire routes die betrokken zijn bij kankercelproliferatie, apoptose en chemoresistentie. De cellijn blijft een cruciaal model voor het onderzoeken van de werkzaamheid van nieuwe therapeutische middelen en voor het verkennen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan dikkedarmkanker.

Weefsel
Rectum
Ziekte
Adenocarcinoom
Synoniemen
  • HCT 8
  • HCT8

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Tumorverwekkend
In naakte muizen
Verdubbelingstijd
15 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HCT-8 (Cytion catalogusnummer 300210)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
CDx (+/-), CDy (-),
Iso-enzymen
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutatieprofiel
HRT-18 cellen dragen een mutatie in codon 13 van het Kras gen: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Virussen
Omgekeerde transcriptase negatief
Producten
Carcinoembryonisch antigeen (CEA) 0,5 ng/10 exp6 cellen/10 dagen, alkalische fosfatase, keratine

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Zaaidichtheid
2 tot 4 x 104 cellen/cm2
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Herstel na ontdooiing
Snel
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
67 jaar