HCT-8 (HRT-18) solut
Cell line · Tuotenumero 300210
HCT-8-solut, jotka tunnetaan myös nimellä ihmisen ileosekaalisen kolorektaalisen adenokarsinooman solut, ovat epiteelisolulinja, joka on alun perin peräisin 67-vuotiaalta valkoihoiselta mieheltä...
Räätälöinti / Suositukset
- HCT-8 (HRT-18) solutCell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
HCT-8-solut, jotka tunnetaan myös nimellä ihmisen ileokekaaliset paksusuolen adenokarsinoomasolut, ovat epiteelisolulinja, joka on alun perin saatu 67-vuotiaalta valkoihoiselta miespotilaalta, jolla oli ileokekaalinen adenokarsinooma. HCT-8-solulinja perustettiin 1960-luvun lopulla, ja sitä hyödynnetään laajalti syöpätutkimuksessa, erityisesti paksusuolisyövän patogeneesin, etäpesäkkeiden ja hoitovasteen tutkimisessa.
Morfologisesti HCT-8-solut ovat epiteelin kaltaisia, ja niillä on monikerroksinen kasvumalli ja monikulmion muoto. Niillä on kyky kasvaa sekä adheesioviljelmissä että puoliksi suspendoituneissa viljelmissä, mikä on ominaista joillekin syöpäsolujen metastaasin siirtymävaiheille. Tämä ominaisuus tekee niistä erityisen hyödyllisiä syöpäsolujen invaasioon ja migraatioon liittyvissä tutkimuksissa.
Genotyyppisesti HCT-8-solut ovat hypertriploideja, ja ne sisältävät useita kromosomipoikkeavuuksia, jotka ovat yleisiä paksusuolen karsinoomille, mukaan lukien mutaatioita ja deleetioita, joilla on merkitystä syövän etenemisen ja resistenssimekanismien kannalta. Tämä geneettinen profiili tukee niiden käyttöä onkologisissa tutkimuksissa, erityisesti niissä, joissa keskitytään kasvainten syntyyn ja lääkeresistenssiin liittyviin geneettisiin reitteihin.
HCT-8-soluja hyödyntävä tutkimus on edistänyt merkittävästi paksu- ja peräsuolisyövän biologian ymmärtämistä, mukaan lukien syöpäsolujen proliferaatioon, apoptoosiin ja kemoresistenssiin liittyvien molekyylireittien selvittäminen. Solulinja on edelleen tärkeä malli uusien terapeuttisten aineiden tehokkuuden tutkimisessa ja paksusuolen syövän taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimisessa.
- Kudos
- Peräsuoli
- Sairaus
- Adenokarsinooma
- Synonyymit
- HCT 8
- HCT8
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
- Kasvaimia aiheuttava
- Alastomilla hiirillä
- Kaksinkertaistumisaika
- 15 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- HCT-8 (Cytionin luettelonumero 300210)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2478
05Ilmentyminen ja alttius
- Antigeenin ilmentyminen
- CDx (+/-), CDy (-),
- Isoentsyymit
- AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
- Mutaatioprofiili
- HRT-18-soluissa on mutaatio Kras-geenin kodonissa 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Virukset
- Käänteinen transkriptaasi negatiivinen
- Tuotteet
- Karsinoembryoninen antigeeni (CEA) 0,5 ng/10 exp6-solua/10 vrk, alkalinen fosfataasi, keratiini
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 2–4 x 104 solua/cm2
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Nopea
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 67 vuotta
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
