Siirry sisältöön
HCT-8 (HRT-18) solut
Kudos
Peräsuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
HCT 8, HCT8

Asiakirjat

HCT-8 (HRT-18) solut

Cell line · Tuotenumero 300210

HCT-8-solut, jotka tunnetaan myös nimellä ihmisen ileosekaalisen kolorektaalisen adenokarsinooman solut, ovat epiteelisolulinja, joka on alun perin peräisin 67-vuotiaalta valkoihoiselta mieheltä...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HCT-8-solut, jotka tunnetaan myös nimellä ihmisen ileokekaaliset paksusuolen adenokarsinoomasolut, ovat epiteelisolulinja, joka on alun perin saatu 67-vuotiaalta valkoihoiselta miespotilaalta, jolla oli ileokekaalinen adenokarsinooma. HCT-8-solulinja perustettiin 1960-luvun lopulla, ja sitä hyödynnetään laajalti syöpätutkimuksessa, erityisesti paksusuolisyövän patogeneesin, etäpesäkkeiden ja hoitovasteen tutkimisessa.

Morfologisesti HCT-8-solut ovat epiteelin kaltaisia, ja niillä on monikerroksinen kasvumalli ja monikulmion muoto. Niillä on kyky kasvaa sekä adheesioviljelmissä että puoliksi suspendoituneissa viljelmissä, mikä on ominaista joillekin syöpäsolujen metastaasin siirtymävaiheille. Tämä ominaisuus tekee niistä erityisen hyödyllisiä syöpäsolujen invaasioon ja migraatioon liittyvissä tutkimuksissa.

Genotyyppisesti HCT-8-solut ovat hypertriploideja, ja ne sisältävät useita kromosomipoikkeavuuksia, jotka ovat yleisiä paksusuolen karsinoomille, mukaan lukien mutaatioita ja deleetioita, joilla on merkitystä syövän etenemisen ja resistenssimekanismien kannalta. Tämä geneettinen profiili tukee niiden käyttöä onkologisissa tutkimuksissa, erityisesti niissä, joissa keskitytään kasvainten syntyyn ja lääkeresistenssiin liittyviin geneettisiin reitteihin.

HCT-8-soluja hyödyntävä tutkimus on edistänyt merkittävästi paksu- ja peräsuolisyövän biologian ymmärtämistä, mukaan lukien syöpäsolujen proliferaatioon, apoptoosiin ja kemoresistenssiin liittyvien molekyylireittien selvittäminen. Solulinja on edelleen tärkeä malli uusien terapeuttisten aineiden tehokkuuden tutkimisessa ja paksusuolen syövän taustalla olevien molekyylimekanismien tutkimisessa.

Kudos
Peräsuoli
Sairaus
Adenokarsinooma
Synonyymit
  • HCT 8
  • HCT8

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Alastomilla hiirillä
Kaksinkertaistumisaika
15 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
HCT-8 (Cytionin luettelonumero 300210)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
CDx (+/-), CDy (-),
Isoentsyymit
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutaatioprofiili
HRT-18-soluissa on mutaatio Kras-geenin kodonissa 13: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Virukset
Käänteinen transkriptaasi negatiivinen
Tuotteet
Karsinoembryoninen antigeeni (CEA) 0,5 ng/10 exp6-solua/10 vrk, alkalinen fosfataasi, keratiini

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Kylvötiheys
2–4 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulamisen jälkeinen palautuminen
Nopea
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
67 vuotta