Células HCT-8 (HRT-18)

As células HCT-8, também conhecidas como células de adenocarcinoma colorretal ileocecal humano, são uma linhagem celular epitelial originalmente derivada de um paciente do sexo masculino, de etnia caucasiana, de 67 anos, com adenocarcinoma ileocecal. A linhagem celular HCT-8 foi estabelecida no final da década de 1960 e é amplamente utilizada na pesquisa sobre o câncer, particularmente no estudo da patogênese, metástase e resposta ao tratamento do câncer colorretal.

Morfologicamente, as células HCT-8 são de tipo epitelial e apresentam um padrão de crescimento em monocamada com forma poligonal. Elas possuem a capacidade de crescer tanto em culturas aderentes quanto em culturas semissuspensas, o que é característico de alguns estágios de transição da metástase das células cancerosas. Essa característica as torna particularmente úteis para estudos relacionados à invasão e migração das células cancerosas.

Genotipicamente, as células HCT-8 são hipertriploides, contendo várias aberrações cromossômicas comuns em carcinomas colorretais, incluindo mutações e deleções relevantes para a progressão do câncer e os mecanismos de resistência. Esse perfil genético justifica seu uso em estudos oncológicos, especialmente aqueles focados nas vias genéticas envolvidas na tumorigênese e na resistência a medicamentos.

Pesquisas que utilizam as células HCT-8 têm contribuído significativamente para a compreensão da biologia do câncer colorretal, incluindo a elucidação de vias moleculares envolvidas na proliferação de células cancerosas, na apoptose e na quimiorresistência. A linhagem celular continua sendo um modelo essencial para investigar a eficácia de novos agentes terapêuticos e para explorar os mecanismos moleculares subjacentes ao câncer colorretal.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.