Tartalomra ugrás
HCT-8 (HRT-18) sejtek
Szövet
Végbél
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
HCT 8, HCT8

Dokumentumok

HCT-8 (HRT-18) sejtek

Cell line · Termékszám 300210

Az HCT-8 sejtek – más néven humán ileocecális kolorektális adenokarcinóma sejtek – egy epiteliális sejtvonal, amelyet eredetileg egy 67 éves kaukázusi férfitól nyertek…

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HCT-8 sejtek, más néven humán ileocecális kolorektális adenokarcinóma sejtek, egy epitélsejtvonal, amely eredetileg egy 67 éves kaukázusi férfi betegből származik, akinek ileocecális adenokarcinómája volt. A HCT-8 sejtvonalat az 1960-as évek végén hozták létre, és széles körben használják a rákkutatásban, különösen a vastagbélrák patogenezisének, metasztázisának és a kezelésre adott válasznak a vizsgálatában.

Morfológiailag a HCT-8 sejtek epithelszerűek, és monoréteges, poligonális alakú növekedési mintázatot mutatnak. Képesek mind tapadó, mind félig szuszpendált kultúrákban növekedni, ami a rákos sejtek metasztázisának egyes átmeneti stádiumaira jellemző. Ez a tulajdonságuk különösen hasznossá teszi őket a rákos sejtek inváziójával és migrációjával kapcsolatos vizsgálatokhoz.

Genotípusos szempontból a HCT-8 sejtek hipertriploidok, és számos kromoszóma-rendellenességet tartalmaznak, amelyek gyakoriak a vastagbélrákos daganatokban, beleértve a rák progressziója és a rezisztencia mechanizmusai szempontjából fontos mutációkat és deléciókat. Ez a genetikai profil támogatja a sejtek felhasználását onkológiai vizsgálatokban, különösen azokban, amelyek a tumorigenezisben és a gyógyszerrezisztenciában szerepet játszó genetikai útvonalakra összpontosítanak.

A HCT-8 sejtek felhasználásával végzett kutatások jelentősen hozzájárultak a vastagbélrák biológiájának megértéséhez, beleértve a rákos sejtek proliferációjában, apoptózisában és kemorezisztenciájában szerepet játszó molekuláris útvonalak feltárását. A sejtvonal továbbra is kritikus modell az új terápiás szerek hatékonyságának vizsgálatához és a vastagbélrák hátterében álló molekuláris mechanizmusok feltárásához.

Szövet
Végbél
Betegség
Adenokarcinóma
Szinonimák
  • HCT 8
  • HCT8

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Meztelen egerekben
Kettőzési idő
15 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HCT-8 (Cytion katalógusszám: 300210)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
CDx (+/-), CDy (-),
Izoenzimek
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutációs profil
A HRT-18 sejtek mutációt hordoznak a Kras gén 13-as kodonjában: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Vírusok
Fordított transzkriptáz negatív
Termékek
Karcinoembrionális antigén (CEA) 0,5 ng/10 exp6 sejt/10 nap, alkalikus foszfatáz, keratin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2–4 x 104 sejt/cm2
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Gyors
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
67 év