Skip to content
เซลล์ HCT-8 (HRT-18)
Tissue
ลำไส้ตรง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
HCT 8, HCT8

Documents

เซลล์ HCT-8 (HRT-18)

Cell line · Product number 300210

HCT-8 cells, also known as human ileocecal colorectal adenocarcinoma cells, are an epithelial cell line originally derived from a 67-year-old Caucasian ma...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ HCT-8 หรือที่รู้จักกันในชื่อเซลล์อะดีโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่และทวารหนักส่วนปลายของมนุษย์ เป็นสายพันธุ์เซลล์เยื่อบุผิวที่ได้มาจากผู้ป่วยชายชาวคอเคเซียนอายุ 67 ปีที่มีอะดีโนคาร์ซิโนมาของลำไส้ใหญ่และทวารหนักส่วนปลาย สายพันธุ์เซลล์ HCT-8 ถูกสร้างขึ้นในช่วงปลายทศวรรษ 1960 และถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายในการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการศึกษาพยาธิกำเนิด การแพร่กระจาย และการตอบสนองต่อการรักษาของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก

ในเชิงสัณฐานวิทยา เซลล์ HCT-8 มีลักษณะคล้ายเซลล์เยื่อบุผิวและแสดงรูปแบบการเจริญเติบโตแบบชั้นเดียวที่มีรูปร่างหลายเหลี่ยม เซลล์เหล่านี้มีความสามารถในการเจริญเติบโตทั้งในวัฒนธรรมแบบยึดเกาะและแบบแขวนลอยบางส่วน ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของบางระยะของการแพร่กระจายของเซลล์มะเร็ง คุณลักษณะนี้ทำให้เซลล์เหล่านี้มีประโยชน์อย่างยิ่งสำหรับการศึกษาที่เกี่ยวข้องกับการรุกรานและการเคลื่อนที่ของเซลล์มะเร็ง

ในเชิงพันธุกรรม เซลล์ HCT-8 เป็นเซลล์ที่มีโครโมโซมเกินสามชุด (hypertriploid) โดยมีความผิดปกติของโครโมโซมหลายประการที่พบบ่อยในมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก รวมถึงการกลายพันธุ์และการขาดหายไปของยีนที่เกี่ยวข้องกับการลุกลามของมะเร็งและกลไกการดื้อยา โปรไฟล์ทางพันธุกรรมนี้สนับสนุนการใช้เซลล์ HCT-8 ในการศึกษาด้านมะเร็งวิทยา โดยเฉพาะอย่างยิ่งการศึกษาที่มุ่งเน้นเส้นทางพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับการเกิดเนื้องอกและการดื้อยา

การวิจัยที่ใช้เซลล์ HCT-8 ได้มีส่วนสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำความเข้าใจชีววิทยาของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก รวมถึงการอธิบายกลไกโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็ง การตายของเซลล์มะเร็ง (apoptosis) และการต้านเคมีบำบัด (chemoresistance) สายเซลล์นี้ยังคงเป็นแบบจำลองที่สำคัญสำหรับการศึกษาประสิทธิภาพของยาใหม่ ๆ และการค้นหาสาเหตุทางโมเลกุลที่อยู่เบื้องหลังมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก

Tissue
ลำไส้ตรง
Disease
อะดีโนคาร์ซิโนมา
Synonyms
  • HCT 8
  • HCT8

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Tumourigenic
ในหนูที่ไม่มีขน
Doubling time
15 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
HCT-8 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300210)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CDx (+/-), CDy (-),
Isoenzymes
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutational profile
เซลล์ HRT-18 มีการกลายพันธุ์ในโคดอนที่ 13 ของยีน Kras: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Viruses
ผลลบต่อเอนไซม์ย้อนกลับทรานสคริปเทส
Products
แอนติเจนคาร์ซิโนเอ็มบริโอนิก (CEA) 0.5 นาโนกรัม/10 เซลล์ exp6/10 วัน, อัลคาไลน์ฟอสฟาเตส, เคราติน

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
2 ถึง 4 x 104 เซลล์/ซม.
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
รวดเร็ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
67 ปี