İçeriğe atla
HCT-8 (HRT-18) Hücreleri
Doku
Rektum
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
HCT 8, HCT8

HCT-8 (HRT-18) Hücreleri

Cell line · Ürün numarası 300210

HCT-8 hücreleri, insan ileo-çekal kolorektal adenokarsinom hücreleri olarak da bilinen, aslen 67 yaşındaki Kafkasyalı bir erkekten elde edilen bir epitel hücre hattıdır...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

İnsan ileoçekal kolorektal adenokarsinom hücreleri olarak da bilinen HCT-8 hücreleri, başlangıçta ileoçekal adenokarsinomlu 67 yaşındaki Kafkasyalı bir erkek hastadan türetilen epitelyal bir hücre hattıdır. HCT-8 hücre hattı 1960'ların sonunda kurulmuştur ve kanser araştırmalarında, özellikle de kolorektal kanser patogenezi, metastaz ve tedavi yanıtı çalışmalarında yaygın olarak kullanılmaktadır.

Morfolojik olarak HCT-8 hücreleri epitel benzeri yapıdadır ve poligonal şekle sahip tek katmanlı bir büyüme modeli sergiler. Kanser hücresi metastazının bazı geçiş aşamalarının karakteristik özelliği olan hem yapışık hem de yarı süspansiyon halindeki kültürlerde büyüme kabiliyetine sahiptirler. Bu özellik, onları kanser hücresi istilası ve göçü ile ilgili çalışmalar için özellikle yararlı kılmaktadır.

Genotipik olarak, HCT-8 hücreleri hipertriploiddir ve kanser ilerlemesi ve direnç mekanizmalarıyla ilgili mutasyonlar ve delesyonlar dahil olmak üzere kolorektal karsinomlarda yaygın olan çeşitli kromozomal sapmalar içerir. Bu genetik profil, özellikle tümör oluşumunda ve ilaç direncinde rol oynayan genetik yolaklara odaklanan onkolojik çalışmalarda kullanımlarını desteklemektedir.

HCT-8 hücrelerini kullanan araştırmalar, kanser hücresi proliferasyonu, apoptoz ve kemorezistans ile ilgili moleküler yolakların aydınlatılması da dahil olmak üzere kolorektal kanser biyolojisinin anlaşılmasına önemli ölçüde katkıda bulunmuştur. Hücre hattı, yeni terapötik ajanların etkinliğini araştırmak ve kolorektal kanserin altında yatan moleküler mekanizmaları keşfetmek için kritik bir model olmaya devam etmektedir.

Doku
Rektum
Hastalık
Adenokarsinom
Eş anlamlılar
  • HCT 8
  • HCT8

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Çıplak farelerde
İki katına çıkma süresi
15 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
HCT-8 (Cytion katalog numarası 300210)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
CDx (+/-), CDy (-),
İzoenzimler
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutasyon profili
HRT-18 hücreleri Kras geninin 13. kodonunda bir mutasyon taşımaktadır: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Virüsler
Ters Transkriptaz negatif
Ürünler
Karsinoembriyonik antijen (CEA) 0,5 ng/10 eksp6 hücre/10 gün, alkalin fosfataz, keratin

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
2 ila 4 x 104 hücre/cm2
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Hızlı
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
67 yıl