Przejdź do treści
Komórki HCT-8 (HRT-18)
Chusteczka
Odbytnica
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
HCT 8, HCT8

Dokumenty

Komórki HCT-8 (HRT-18)

Cell line · Numer produktu 300210

Komórki HCT-8, znane również jako komórki ludzkiego gruczolakoraka jelita grubego w odcinku jelita krętego i jelita ślepego, to linia komórek nabłonkowych pochodząca pierwotnie od 67-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki HCT-8, znane również jako ludzkie komórki gruczolakoraka jelita krętego, są nabłonkową linią komórkową pierwotnie pochodzącą od 67-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej z gruczolakorakiem jelita krętego. Linia komórkowa HCT-8 została utworzona pod koniec lat 60. i jest szeroko wykorzystywana w badaniach nad rakiem, w szczególności w badaniach nad patogenezą raka jelita grubego, przerzutami i odpowiedzią na leczenie.

Morfologicznie, komórki HCT-8 są podobne do nabłonka i wykazują jednowarstwowy wzór wzrostu o wielokątnym kształcie. Posiadają zdolność do wzrostu zarówno w kulturach przylegających, jak i półzawieszonych, co jest charakterystyczne dla niektórych przejściowych etapów przerzutów komórek nowotworowych. Ta cecha czyni je szczególnie przydatnymi w badaniach związanych z inwazją i migracją komórek nowotworowych.

Genotypowo, komórki HCT-8 są hipertriploidalne i zawierają kilka aberracji chromosomalnych powszechnych w raku jelita grubego, w tym mutacje i delecje, które są istotne dla progresji raka i mechanizmów oporności. Ten profil genetyczny wspiera ich wykorzystanie w badaniach onkologicznych, zwłaszcza tych skupiających się na szlakach genetycznych zaangażowanych w nowotworzenie i oporność na leki.

Badania wykorzystujące komórki HCT-8 znacząco przyczyniły się do zrozumienia biologii raka jelita grubego, w tym do wyjaśnienia szlaków molekularnych zaangażowanych w proliferację komórek nowotworowych, apoptozę i chemiooporność. Linia komórkowa HCT-8 nadal jest krytycznym modelem do badania skuteczności nowych środków terapeutycznych oraz do badania mechanizmów molekularnych leżących u podstaw raka jelita grubego.

Chusteczka
Odbytnica
Choroba
Gruczolakorak
Synonimy
  • HCT 8
  • HCT8

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
U nagich myszy
Czas podwojenia
15 godzin

04Identyfikatory

Źródło
HCT-8 (numer katalogowy Cytion 300210)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
CDx (+/-), CDy (-),
Izoenzymy
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Profil mutacji
Komórki HRT-18 są nosicielami mutacji w kodonie 13 genu Kras: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Wirusy
Odwrotna transkryptaza ujemna
Produkty
Antygen rakowo-płodowy (CEA) 0,5 ng/10 komórek exp6/10 dni, fosfataza alkaliczna, keratyna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
2 do 4 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Szybko
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
67 lat