Pereiti prie turinio
HCT-8 (HRT-18) ląstelės
Audinys
Tiesioji žarna
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
HCT 8, HCT8

Dokumentai

HCT-8 (HRT-18) ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300210

HCT-8 ląstelės, taip pat žinomos kaip žmogaus ileocecalinės kolorektalinės adenokarcinomos ląstelės, yra epitelio ląstelių linija, iš pradžių gauta iš 67 metų amžiaus kaukazietės...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HCT-8 ląstelės, taip pat žinomos kaip žmogaus ileocelinės kolorektalinės adenokarcinomos ląstelės, yra epitelinių ląstelių linija, iš pradžių gauta iš 67 metų kaukaziečio paciento, sergančio ileoceline adenokarcinoma. HCT-8 ląstelių linija buvo sukurta XX a. septintojo dešimtmečio pabaigoje ir plačiai naudojama vėžio tyrimams, ypač tiriant storosios žarnos vėžio patogenezę, metastazes ir atsaką į gydymą.

Morfologiškai HCT-8 ląstelės yra panašios į epitelines ir pasižymi daugiakampio formos daugiasluoksniu augimo modeliu. Jos gali augti tiek adherentinėse, tiek pusiau suspenduotose kultūrose, o tai būdinga kai kurioms pereinamosioms vėžio ląstelių metastazavimo stadijoms. Dėl šios savybės jos ypač naudingos atliekant tyrimus, susijusius su vėžio ląstelių invazija ir migracija.

Genotipiškai HCT-8 ląstelės yra hipertriploidinės, jose yra keletas chromosomų aberacijų, būdingų storosios žarnos karcinomams, įskaitant mutacijas ir delecijas, kurios yra svarbios vėžio progresavimui ir atsparumo mechanizmams. Toks genetinis profilis padeda jas naudoti onkologiniuose tyrimuose, ypač tuose, kuriuose daugiausia dėmesio skiriama genetiniams keliams, susijusiems su naviko geneze ir atsparumu vaistams.

Tyrimai, kuriuose naudojamos HCT-8 ląstelės, labai prisidėjo prie storosios žarnos vėžio biologijos supratimo, įskaitant vėžio ląstelių proliferacijos, apoptozės ir chemorezistentiškumo molekulinių kelių išaiškinimą. Ši ląstelių linija ir toliau išlieka svarbiu modeliu tiriant naujų terapinių preparatų veiksmingumą ir nagrinėjant molekulinius kolorektalinio vėžio mechanizmus.

Audinys
Tiesioji žarna
Liga
Adenokarcinoma
Sinonimai
  • HCT 8
  • HCT8

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Tumorogeninis
Su nuogomis pelėmis
Laikas, per kurį skaičius padvigubėja
15 valandų

04Identifikatoriai

Nuoroda
HCT-8 (Cytion katalogo numeris 300210)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
CDx (+/-), CDy (-),
Izofermentai
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutacijų profilis
HRT-18 ląstelėse yra Kras geno 13 kodono mutacija: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Virusai
Atvirkštinė transkriptazė neigiama
Produktai
Karcinoembrioninis antigenas (CEA) 0,5 ng/10 eksp6 ląstelių/10 dienų, šarminė fosfatazė, keratinas

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
2–4 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atkūrimas po atšilimo
Greitai
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
67 metai