תאי HCT-8 (HRT-18)
Cell line · Product number 300210
HCT-8 cells, also known as human ileocecal colorectal adenocarcinoma cells, are an epithelial cell line originally derived from a 67-year-old Caucasian ma...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
תאי HCT-8, הידועים גם כתאי אדנוקרצינומה של המעי הגס והמעי העקום בבני אדם, הם קו תאים אפיתל שמקורו בחולה גבר לבן בן 67 עם אדנוקרצינומה של המעי הגס והמעי העקום. קו התאים HCT-8 הוקם בסוף שנות ה-60 של המאה הקודמת, והוא נמצא בשימוש נרחב במחקר הסרטן, במיוחד בחקר הפתוגנזה, הגרורות ותגובת הטיפול בסרטן המעי הגס.
מבחינה מורפולוגית, תאי HCT-8 דומים לתאי אפיתל ומציגים דפוס צמיחה חד-שכבתי בעל צורה מצולעת. הם בעלי יכולת לצמוח בתרבויות דבקות וחצי-מרחפות, המאפיינת כמה שלבים מעבר של גרורות תאי סרטן. תכונה זו הופכת אותם לשימושיים במיוחד במחקרים הקשורים לפלישה ולהגירה של תאי סרטן.
מבחינה גנוטיפית, תאי HCT-8 הם היפר-טריפלואידים, ומכילים מספר חריגות כרומוזומליות הנפוצות בקרצינומות של המעי הגס, כולל מוטציות ומחיקות הרלוונטיות להתקדמות הסרטן ולמנגנוני העמידות. פרופיל גנטי זה תומך בשימוש בהם במחקרים אונקולוגיים, במיוחד אלה המתמקדים במסלולים גנטיים המעורבים בגידול גידולים ובעמידות לתרופות.
מחקרים המשתמשים בתאי HCT-8 תרמו באופן משמעותי להבנת הביולוגיה של סרטן המעי הגס, כולל הבהרת המסלולים המולקולריים המעורבים בשגשוג תאי סרטן, אפופטוזיס ועמידות לכימותרפיה. קו התאים ממשיך להיות מודל קריטי לחקר היעילות של חומרים טיפוליים חדשים ולחקר המנגנונים המולקולריים העומדים בבסיס סרטן המעי הגס.
- Tissue
- רקטום
- Disease
- אדנוקרצינומה
- Synonyms
- HCT 8
- HCT8
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- בעכברים עירומים
- Doubling time
- 15 שעות
04Identifiers
- Citation
- HCT-8 (מספר קטלוגי Cytion 300210)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_2478
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- CDx (+/-), CDy (-),
- Isoenzymes
- AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
- Mutational profile
- תאי HRT-18 נושאים מוטציה בקודון 13 של גן Kras: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
- Viruses
- טרנסקריפטאז שלילי
- Products
- אנטיגן קרצינואמבריוני (CEA) 0.5 ng/10 exp6 תאים/10 ימים, פוספטאז אלקליין, קרטין
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L גלוקוז, w: 2.5 mM L-גלוטמין, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM נתרן פירובט, w: 1.2 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 2 עד 4 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- מהיר
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- 67 שנים
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes
