Gå direkte til indholdet
HCT-8 (HRT-18) celler
Væv
Rektum
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
HCT 8, HCT8

Dokumenter

HCT-8 (HRT-18) celler

Cell line · Varenummer 300210

HCT-8-celler, også kendt som humane ileocekale kolorektale adenokarcinomceller, er en epitelcellelinje, der oprindeligt stammer fra en 67-årig kaukasisk mand...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HCT-8-celler, også kendt som humane ileocecale kolorektale adenokarcinomceller, er en epitelcellelinje, der oprindeligt stammer fra en 67-årig kaukasisk mandlig patient med ileocecal adenokarcinom. HCT-8-cellelinjen blev etableret i slutningen af 1960'erne og anvendes i vid udstrækning inden for kræftforskning, især i studiet af kolorektal kræftpatogenese, metastase og behandlingsrespons.

Morfologisk set er HCT-8-celler epitellignende og udviser et monolag-vækstmønster med en polygonal form. De har evnen til at vokse i både klæbende og halvsuspenderede kulturer, hvilket er karakteristisk for nogle overgangsstadier af kræftcellers metastase. Denne egenskab gør dem særligt nyttige til undersøgelser af kræftcellers invasion og migration.

Genotypisk er HCT-8-celler hypertriploide og indeholder flere kromosomafvigelser, der er almindelige i kolorektale karcinomer, herunder mutationer og deletioner, der er relevante for kræftprogression og resistensmekanismer. Denne genetiske profil understøtter deres brug i onkologiske studier, især dem, der fokuserer på genetiske veje, der er involveret i tumorigenese og lægemiddelresistens.

Forskning med HCT-8-celler har bidraget væsentligt til forståelsen af kolorektal cancerbiologi, herunder belysning af molekylære veje, der er involveret i cancercellers spredning, apoptose og kemoresistens. Cellelinjen er fortsat en kritisk model til at undersøge effekten af nye terapeutiske midler og til at udforske de molekylære mekanismer, der ligger til grund for kolorektal cancer.

Væv
Rektum
Sygdom
Adenokarcinom
Synonymer
  • HCT 8
  • HCT8

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
I nøgne mus
Fordoblingstid
15 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HCT-8 (Cytion katalognummer 300210)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_2478

05Udtryk og modtagelighed

Antigenudtryk
CDx (+/-), CDy (-),
Isoenzymer
AK-1, 1, ES-D, 1-2, GLO-1, 2, G6PD, B, PGM1, 1, PGM3, 1, Me-2, 1
Mutationsprofil
HRT-18-celler bærer en mutation i kodon 13 i Kras-genet: GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
Vira
Omvendt transkriptase negativ
Produkter
Carcinoembryonalt antigen (CEA) 0,5 ng/10 exp6 celler/10 dage, alkalisk fosfatase, keratin

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
2 til 4 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Hurtig
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
67 år