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HCT-8(HRT-18)細胞
ティッシュ
直腸
病気
腺癌
同義語
HCT 8, HCT8

HCT-8(HRT-18)細胞

Cell line · 製品番号 300210

HCT-8細胞は、ヒト回盲部大腸腺癌細胞としても知られ、もともと67歳の白人男性から樹立された上皮細胞株である...

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01概要

説明

HCT-8細胞は、ヒト回盲部大腸腺癌細胞としても知られ、元々は回盲部腺癌の67歳の白人男性患者由来の上皮細胞株である。HCT-8細胞株は1960年代後半に樹立され、癌研究、特に大腸癌の病態、転移、治療反応の研究に広く利用されている。

形態学的には、HCT-8細胞は上皮様で、多角形の単層増殖パターンを示す。HCT-8細胞は接着培養と半懸濁培養の両方で増殖する能力を有しており、これは癌細胞転移のいくつかの過渡期に特徴的である。この特徴は、がん細胞の浸潤と移動に関する研究に特に有用である。

遺伝子型的には、HCT-8細胞は超3倍体であり、癌の進行や耐性機構に関連する突然変異や欠失を含む、大腸癌によく見られるいくつかの染色体異常を含んでいる。この遺伝子プロフィールは、腫瘍学的研究、特に腫瘍形成と薬剤耐性に関与する遺伝的経路に焦点を当てた研究での使用を支持している。

HCT-8細胞を用いた研究は、癌細胞の増殖、アポトーシス、化学療法抵抗性に関与する分子経路の解明を含め、大腸癌生物学の理解に大きく貢献してきた。この細胞株は、新規治療薬の有効性を調べ、大腸癌の根底にある分子機構を探求する上で重要なモデルであり続けている。

ティッシュ
直腸
病気
腺癌
同義語
  • HCT 8
  • HCT8

02分類

生物
人間
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様
腫瘍形成性
ヌードマウス
倍増時間
15時間

04識別子

引用
HCT-8(Cytion カタログ番号 300210)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_2478

05発現と感受性

抗原発現
CDx(+/-)、CDy(-)、
アイソザイム
AK-1、1、ES-D、1-2、GLO-1、2、G6PD、B、PGM1、1、PGM3、1、Me-2、1
変異プロファイル
HRT-18細胞はKras遺伝子のコドン13に変異を持つ:GGC(Wt Gly) >GAC(Asp)
ウイルス
逆転写酵素陰性
製品
Carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10 exp6細胞/10日、アルカリホスファターゼ、ケラチン

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
2~4 × 10⁴ 細胞/cm²
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
速い
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
67年