LLC-PK1

Les cellules LLC-PK1 constituent une lignée cellulaire bien établie et largement utilisée dans la recherche biomédicale. Ces cellules proviennent du rein d’un porc mâle en bonne santé et présentent une morphologie épithéliale typique. La lignée LLC-PK1 est polarisée et comporte des jonctions serrées, ce qui en fait un modèle idéal pour les tissus épithéliaux.

L’une des caractéristiques essentielles des cellules LLC-PK1 est leur capacité à produire de l’activateur du plasminogène, une substance qui stimule la fibrinolyse. Cette propriété a rendu les cellules LLC-PK1 particulièrement précieuses dans la recherche sur la thrombose.

Ces dernières années, l’activateur du plasminogène a été intégré à des médicaments utilisés dans les traitements de la thrombose, car il facilite la dissolution des petits caillots sanguins. En plus de produire des activateurs du plasminogène, les cellules LLC-PK1 produisent de grandes quantités de cytokératine. Cette caractéristique les a rendues très prisées pour diverses recherches pharmacologiques et métaboliques.

La lignée LLC-PK1 a été utilisée dans des études sur le métabolisme, le transport, la toxicité et les interactions des médicaments. Les cellules LLC-PK1 sont également fréquemment utilisées dans les tests de perméabilité. Le mécanisme de transport de l’uracile diffère selon les lignées cellulaires : on observe un système indépendant du Na+ sur la membrane basolatérale des cellules Caco-2, tandis que les cellules LLC-PK1 présentent à la fois des systèmes dépendants et indépendants du Na+ sur la membrane apicale.

Comparativement à d’autres lignées cellulaires, les cellules LLC-PK1 partagent de nombreuses caractéristiques des cellules tubulaires proximales in vivo, notamment la présence de microvillosités sur la membrane apicale, une activité élevée des enzymes de la membrane apicale, ainsi que l’expression de récepteurs de l’hormone parathyroïdienne et de transporteurs de glucose dépendants du sodium. Cela fait des cellules LLC-PK1 un outil précieux dans les études de toxicologie rénale. Une autre lignée cellulaire couramment utilisée dans les études de toxicologie rénale est la lignée cellulaire MDCK. À l’instar des cellules LLC-PK1, les cellules MDCK sont épithéliales, mais présentent des caractéristiques plus typiques des cellules tubulaires distales.

Elles expriment des récepteurs de la vasopressine, de l’ocytocine et des prostaglandines qui, lorsqu’ils sont stimulés, activent l’adénylate cyclase. Les lignées cellulaires LLC-PK1 et MDCK prolifèrent rapidement et peuvent être repiquées facilement pendant de nombreuses générations dans des cultures monocouches. Les cellules LLC-PK1 sont également capables de former des « dômes », des cloques remplies de liquide résultant du transport de l’eau et des solutés, des jonctions serrées et de l’adhésion des cellules au substrat.

En conclusion, la lignée cellulaire LLC-PK1 constitue un outil polyvalent et précieux pour la recherche biomédicale. Elle a été largement utilisée dans diverses études portant sur le métabolisme des médicaments, le transport des médicaments, la toxicité des médicaments, les interactions médicamenteuses, la toxicologie rénale et les essais de perméabilité. Grâce à leur morphologie épithéliale bien établie et à leur production d’activateur du plasminogène et de cytokératine, les cellules LLC-PK1 constituent un modèle idéal pour les tissus épithéliaux.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.