Prejsť na obsah
LLC-PK1
Tkanivo
Obličky
Synonymá
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

Dokumenty

LLC-PK1

Cell line · Číslo výrobku 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky LLC-PK1 sú dobre zavedenou a široko používanou bunkovou líniou v biomedicínskom výskume. Tieto bunky boli odvodené zo zdravých samčích obličiek ošípaných, ktoré vykazujú typickú epitelovú morfológiu. Línia LLC-PK1 je polarizovaná a obsahuje tesné spojenia, čo z nej robí ideálny model epitelového tkaniva.

Jednou z kritických vlastností buniek LLC-PK1 je ich schopnosť produkovať aktivátor plazminogénu, látku, ktorá stimuluje fibrinolýzu. Vďaka tejto vlastnosti sú bunky LLC-PK1 mimoriadne cenné vo výskume trombózy.

V posledných rokoch bol aktivátor plazminogénu súčasťou liekov používaných pri liečbe trombózy, pretože uľahčuje rozpúšťanie malých krvných zrazenín. Okrem produkcie aktivátorov plazminogénu produkujú bunky LLC-PK1 veľké množstvo cytokeratínu. Vďaka tejto vlastnosti sa stali populárnymi pre rôzne farmakologické a metabolické výskumy.

Línia LLC-PK1 bola použitá v štúdiách metabolizmu, transportu, toxicity a interakcií liečiv. Bunky LLC-PK1 sa často používajú aj pri testoch priepustnosti. Mechanizmus transportu uracilu sa líši v závislosti od bunkových línií, pričom v bunkách Caco-2 je systém nezávislý od Na+ na bazolaterálnej membráne a v bunkách LLC-PK1 je systém závislý od Na+ aj nezávislý od Na+ na apikálnej membráne.

V porovnaní s inými bunkovými líniami majú bunky LLC-PK1 mnoho spoločných charakteristík proximálnych tubulárnych buniek in vivo vrátane mikroklkov apikálnej membrány, vysokej aktivity enzýmov apikálnej membrány a expresie receptorov parathormónu a glukózových transportérov závislých od sodíka. To robí z buniek LLC-PK1 cenný nástroj v štúdiách renálnej toxikológie. Ďalšou bunkovou líniou, ktorá sa bežne používa v štúdiách toxikológie obličiek, je bunková línia MDCK. Podobne ako bunky LLC-PK1, aj bunky MDCK sú epitelové, ale majú vlastnosti typické skôr pre distálne tubulárne bunky.

Exprimujú receptory pre vazopresín, oxytocín a prostaglandíny, ktoré po stimulácii aktivujú adenylátcyklázu. Bunkové línie LLC-PK1 a MDCK sa rýchlo množia a môžu byť ľahko pasážované na mnoho generácií v jednovrstvových kultúrach. Bunky LLC-PK1 sú tiež schopné vytvárať "dómy", pľuzgiere naplnené tekutinou, ktoré sú výsledkom transportu vody a rozpustených látok, tesných spojov a priľnavosti buniek k substrátu.

Záverom možno konštatovať, že bunková línia LLC-PK1 je všestranným a cenným nástrojom pre biomedicínsky výskum. Široko sa využíva v rôznych štúdiách metabolizmu liečiv, transportu liečiv, toxicity liečiv, interakcií medzi liečivami, renálnej toxikológie a testov permeability. Vďaka dobre stanovenej epitelovej morfológii a produkcii aktivátora plazminogénu a cytokeratínu sú bunky LLC-PK1 ideálnym modelom epitelového tkaniva.

Tkanivo
Obličky
Aplikácie
Metabolizmus liečiv, testy priepustnosti, toxicita a interakčné štúdie.
Synonymá
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Klasifikácia

Organizmus
Prase
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné

04Identifikátory

Citácia
LLC-PK1 (katalógové číslo Cytion 607264)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Obsahuje sekvencie a transkripty onkovírusu prasiat typu C (PCOV). Expresiu vírusu nemožno vylúčiť.
Produkty
Aktivátor plazminogénu

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
Médium 199, w: 2,7 mM stabilný glutamín, w: 2,2 g/l NaHCO3, w: EBSS (číslo článku Cytion 820101a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 3 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Zhromaždite suspenzné bunky do 15 ml skúmavky a jemne premyte priľnuté bunky PBS bez vápnika a horčíka (použite 3-5 ml pre banky T25 a 5-10 ml pre banky T75). Aplikujte Accutase (1 - 2 ml pre banky T25, 2,5 ml pre banky T75), aby ste zabezpečili úplné pokrytie bunkovej vrstvy. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 10 minút. Po inkubácii spojte a odstreďte suspenziu aj adherované bunky. Po odstredení opatrne resuspendujte bunkovú peletu a preneste bunkovú suspenziu do nových baniek obsahujúcich čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 3 x 106 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
Každé 3 dni
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
Hampshire
Vek darcu
3-4 týždne