الانتقال إلى المحتوى
LLC-PK1
الأنسجة
الكلى
المرادفات
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

المستندات

LLC-PK1

Cell line · رقم المنتج 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

خلايا LLC-PK1 هي خط خلوي راسخ ومستخدم على نطاق واسع في الأبحاث الطبية الحيوية. وقد تم اشتقاق هذه الخلايا من كلية ذكر خنزير سليم، وتظهر مورفولوجيا طلائية نموذجية. يتميز خط خلايا LLC-PK1 بأنه مستقطب ويحتوي على تقاطعات محكمة، مما يجعله نموذجاً مثالياً للأنسجة الظهارية.

وتتمثل إحدى السمات الهامة لخلايا LLC-PK1 في قدرتها على إنتاج منشط البلازمينوجين، وهي مادة تحفز تحلل الفيبرين. وقد جعلت هذه الخاصية خلايا LLC-PK1 ذات قيمة خاصة في أبحاث التخثر.

وفي السنوات الأخيرة، تم تضمين منشط البلازمينوجين في الأدوية المستخدمة في علاجات التخثر لأنه يسهل انحلال الجلطات الدموية الصغيرة. وبالإضافة إلى إنتاج منشط البلازمينوجين، تنتج خلايا LLC-PK1 كميات كبيرة من السيتوكيراتين. وقد جعلتها هذه الخاصية شائعة في العديد من التحقيقات البحثية الدوائية والاستقلابية.

وقد استُخدم خط LLC-PK1 في دراسات الأيض الدوائي والنقل والسمية والتفاعل. كما تُستخدم خلايا LLC-PK1 بشكل متكرر في فحوصات النفاذية. تختلف آلية نقل اليوراسيل اعتمادًا على خطوط الخلايا، مع وجود نظام يعتمد على الصوديوم+ على الغشاء القمي في خلايا Caco-2، ونظام يعتمد على الصوديوم+ ونظام مستقل عن الصوديوم على الغشاء القمي في خلايا LLC-PK1.

وبالمقارنة مع خطوط الخلايا الأخرى، تشترك خلايا LLC-PK1 في العديد من خصائص الخلايا الأنبوبية القريبة في الجسم الحي، بما في ذلك الزوائد الدقيقة للغشاء القمي، والأنشطة العالية لإنزيمات الغشاء القمي، والتعبير عن مستقبلات هرمون الغدة الجار درقية وناقلات الجلوكوز المعتمدة على الصوديوم. وهذا يجعل من خلايا LLC-PK1 أداة قيّمة في دراسات السموم الكلوية. هناك خط خلوي آخر شائع الاستخدام في دراسات السمية الكلوية وهو خط خلايا MDCK. وعلى غرار خلايا LLC-PK1، فإن خلايا MDCK هي خلايا طلائية ولكنها تتميز بخصائص أكثر نموذجية للخلايا الأنبوبية البعيدة.

وهي تعبّر عن مستقبلات الفازوبريسين والأوكسيتوسين والبروستاغلاندين، والتي عند تحفيزها تنشط إنزيم الأدينيلات سيكلز. تتكاثر سلالات خلايا LLC-PK1 وخلايا MDCK بسرعة ويمكن تمريرها بسهولة لعدة أجيال في مزارع أحادية الطبقة. كما أن خلايا LLC-PK1 قادرة أيضًا على تشكيل "قباب" وبثور مملوءة بالسوائل ناتجة عن نقل الماء والمذابات، والوصلات الضيقة، والتصاق الخلايا بالطبقة التحتية.

وفي الختام، يُعد خط خلايا LLC-PK1 أداة متعددة الاستخدامات وقيّمة للأبحاث الطبية الحيوية. وقد استُخدم على نطاق واسع في العديد من الدراسات حول استقلاب الدواء، ونقل الدواء، وسمية الدواء، والتفاعلات بين الدواء والدواء، وعلم السموم الكلوية، ومقايسات النفاذية. تعد خلايا LLC-PK1 نموذجاً مثالياً للأنسجة الظهارية بفضل مورفولوجيتها الظهارية الراسخة وإنتاجها لمنشط البلازمينوجين والسيتوكيراتين.

الأنسجة
الكلى
التطبيقات
استقلاب العقاقير ومقايسات النفاذية والسمية ودراسات التفاعل.
المرادفات
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02التصنيف

كائن حي
خنزير
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
LLC-PK1 (كتالوج سايتيون رقم 607264)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9823
سيلوصور
CVCL_0391

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
يحتوي على تسلسلات ونصوص فيروس كورونا الخنزير من النوع C (PCOV). لا يمكن استبعاد التعبير الفيروسي.
المنتجات
منشط البلازمينوجين

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
الوسط 199، ث: 2.7 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820101a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
دعم الوسط ب3% من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
اجمع الخلايا المعلقة في أنبوب سعة 15 مل واغسل الخلايا الملتصقة برفق باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم (استخدم 3-5 مل لقوارير T25 و5-10 مل لقوارير T75). ضع أكوتاز (1-2 مل لقوارير T25، و2.5 مل لقوارير T75) لضمان تغطية كاملة لطبقة الخلايا. اسمح للخلايا بالاحتضان في درجة حرارة الغرفة لمدة 10 دقائق. بعد الحضانة، اخلط كل من الخلايا المعلقة والخلايا الملتصقة واطردها مركزيًا. بعد الطرد المركزي، يُعاد بعناية إعادة ترسيب كريات الخلايا بعناية ونقل المعلق الخلوي إلى قوارير جديدة تحتوي على وسط جديد.
كثافة البذر
1 إلى 3 × 106 خلية/سم2
تجديد السوائل
كل 3 أيام
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
هامبشاير
عمر المتبرع
3-4 أسابيع