LLC-PK1

LLC-PK1 hücreleri biyomedikal araştırmalarda iyi kurulmuş ve yaygın olarak kullanılan bir hücre hattıdır. Bu hücreler, tipik epitelyal morfoloji sergileyen sağlıklı bir erkek domuz böbreğinden elde edilmiştir. LLC-PK1 hattı polarizedir ve sıkı bağlantılar içerir, bu da onu epitelyal doku için ideal bir model haline getirir.

LLC-PK1 hücrelerinin kritik özelliklerinden biri, fibrinolizi uyaran bir madde olan plazminojen aktivatörü üretme yetenekleridir. Bu özellik LLC-PK1 hücrelerini tromboz araştırmalarında özellikle değerli hale getirmiştir.

Son yıllarda plazminojen aktivatörü, küçük kan pıhtılarının çözülmesini kolaylaştırdığı için tromboz tedavilerinde kullanılan ilaçlara dahil edilmiştir. Plazminojen aktivatörleri üretmenin yanı sıra LLC-PK1 hücreleri büyük miktarlarda sitokeratin üretir. Bu özellik onları çeşitli farmakolojik ve metabolik araştırma incelemeleri için popüler hale getirmiştir.

LLC-PK1 hattı ilaç metabolizması, taşınması, toksisitesi ve etkileşim çalışmalarında kullanılmıştır. LLC-PK1 hücreleri geçirgenlik deneylerinde de sıklıkla kullanılmaktadır. Urasil taşıma mekanizması, Caco-2 hücrelerinde bazolateral membranda Na+-bağımsız bir sistem ve LLC-PK1 hücrelerinde apikal membranda hem Na+-bağımlı hem de Na+-bağımsız sistemler ile hücre hatlarına bağlı olarak farklılık gösterir.

Diğer hücre hatlarıyla karşılaştırıldığında LLC-PK1 hücreleri, apikal membran mikrovillusları, apikal membran enzimlerinin yüksek aktiviteleri ve paratiroid hormon reseptörleri ile sodyuma bağımlı glukoz taşıyıcılarının ekspresyonu dahil olmak üzere in vivo proksimal tübüler hücrelerin birçok özelliğini paylaşmaktadır. Bu durum LLC-PK1 hücrelerini renal toksikoloji çalışmalarında değerli bir araç haline getirmektedir. Renal toksikoloji çalışmalarında yaygın olarak kullanılan bir diğer hücre hattı da MDCK hücre hattıdır. LLC-PK1 hücreleri gibi MDCK hücreleri de epitelyaldir ancak daha çok distal tübüler hücrelere özgü özelliklere sahiptir.

Uyarıldıklarında adenilat siklazı aktive eden vazopressin, oksitosin ve prostaglandin reseptörlerini ifade ederler. LLC-PK1 ve MDCK hücre hatları hızla çoğalır ve tek tabakalı kültürlerde birçok nesil boyunca kolayca pasajlanabilir. LLC-PK1 hücreleri ayrıca su ve çözünen madde taşınımı, sıkı bağlantılar ve hücrelerin alt tabakaya yapışmasından kaynaklanan sıvı dolu kabarcıklar olan 'kubbeler' oluşturabilmektedir.

Sonuç olarak, LLC-PK1 hücre hattı biyomedikal araştırmalar için çok yönlü ve değerli bir araçtır. İlaç metabolizması, ilaç taşınması, ilaç toksisitesi, ilaç-ilaç etkileşimleri, renal toksikoloji ve geçirgenlik deneyleri üzerine çeşitli çalışmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. İyi yapılandırılmış epitelyal morfolojisi, plazminojen aktivatörü ve sitokeratin üretimi ile LLC-PK1 hücreleri epitelyal doku için ideal bir modeldir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın