LLC-PK1

As células LLC-PK1 são uma linha celular bem estabelecida e amplamente utilizada na investigação biomédica. Estas células foram derivadas de um rim de porco macho saudável, exibindo uma morfologia epitelial típica. A linha LLC-PK1 é polarizada e contém junções estreitas, o que a torna um modelo ideal para o tecido epitelial.

Uma das caraterísticas críticas das células LLC-PK1 é a sua capacidade de produzir ativador de plasminogénio, uma substância que estimula a fibrinólise. Esta propriedade tornou as células LLC-PK1 particularmente valiosas na investigação da trombose.

Nos últimos anos, o ativador do plasminogénio foi incluído em medicamentos utilizados em terapias contra a trombose, uma vez que facilita a dissolução de pequenos coágulos sanguíneos. Para além de produzirem activadores do plasminogénio, as células LLC-PK1 produzem grandes quantidades de citoqueratina. Esta caraterística tornou-as populares para várias investigações farmacológicas e metabólicas.

A linha LLC-PK1 tem sido utilizada em estudos de metabolismo, transporte, toxicidade e interação de medicamentos. As células LLC-PK1 são também frequentemente utilizadas em ensaios de permeabilidade. O mecanismo de transporte do uracilo difere consoante as linhas celulares, com um sistema independente de Na+ na membrana basolateral das células Caco-2 e sistemas dependentes e independentes de Na+ na membrana apical das células LLC-PK1.

Em comparação com outras linhas celulares, as células LLC-PK1 partilham muitas caraterísticas das células tubulares proximais in vivo, incluindo microvilosidades da membrana apical, actividades elevadas de enzimas da membrana apical e expressão de receptores da hormona paratiroide e transportadores de glucose dependentes de sódio. Este facto faz das células LLC-PK1 uma ferramenta valiosa nos estudos de toxicologia renal. Outra linha celular habitualmente utilizada em estudos de toxicologia renal é a linha celular MDCK. Tal como as células LLC-PK1, as células MDCK são epiteliais, mas têm caraterísticas mais típicas das células tubulares distais.

Expressam receptores de vasopressina, oxitocina e prostaglandina, que, quando estimulados, activam a adenilato ciclase. As linhas de células LLC-PK1 e MDCK proliferam rapidamente e podem ser passadas facilmente durante muitas gerações em culturas de monocamada. As células LLC-PK1 são também capazes de formar "cúpulas", bolhas cheias de fluido resultantes do transporte de água e soluto, de junções estreitas e da adesão das células ao substrato.

Em conclusão, a linha celular LLC-PK1 é uma ferramenta versátil e valiosa para a investigação biomédica. Tem sido amplamente utilizada em vários estudos sobre o metabolismo dos medicamentos, o transporte de medicamentos, a toxicidade dos medicamentos, as interações medicamentosas, a toxicologia renal e os ensaios de permeabilidade. Com a sua morfologia epitelial bem estabelecida e a produção de ativador do plasminogénio e citoqueratina, as células LLC-PK1 são um modelo ideal para o tecido epitelial.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia