Tartalomra ugrás
LLC-PK1
Szövet
Vese
Szinonimák
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

Dokumentumok

LLC-PK1

Cell line · Termékszám 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az LLC-PK1 sejtek jól bevált és széles körben használt sejtvonal az orvosbiológiai kutatásban. Ezek a sejtek egészséges hím sertés veséjéből származnak, és tipikus epiteliális morfológiát mutatnak. Az LLC-PK1 vonal polarizált és szoros kötéseket tartalmaz, így ideális modellje a hámszövetnek.

Az LLC-PK1 sejtek egyik kritikus jellemzője, hogy képesek plazminogén-aktivátort, a fibrinolízist serkentő anyagot termelni. Ez a tulajdonsága különösen értékessé tette az LLC-PK1 sejteket a trombózis kutatásában.

Az utóbbi években a plazminogén-aktivátor bekerült a trombózis terápiájában használt gyógyszerek közé, mivel elősegíti a kisebb vérrögök feloldását. A plazminogén-aktivátorok termelésén kívül az LLC-PK1 sejtek nagy mennyiségű citokeratint is termelnek. Ez a tulajdonságuk népszerűvé tette őket különböző farmakológiai és anyagcsere-kutatási vizsgálatokhoz.

Az LLC-PK1 vonalat használták a gyógyszerek metabolizmusának, transzportjának, toxicitásának és kölcsönhatásainak vizsgálatára. Az LLC-PK1 sejteket gyakran használják permeabilitási vizsgálatokban is. Az uraciltranszport mechanizmusa sejtvonaltól függően különbözik, a Caco-2 sejtekben a bazolaterális membránon Na+-független rendszer, míg az LLC-PK1 sejtekben az apikális membránon Na+-függő és Na+-független rendszer egyaránt megtalálható.

Más sejtvonalakkal összehasonlítva az LLC-PK1 sejtek számos jellemzője megegyezik a proximális tubuláris sejtek in vivo jellemzőivel, beleértve az apikális membrán mikrovillákat, az apikális membrán enzimek magas aktivitását, valamint a parathormon-receptorok és a nátriumfüggő glükóztranszporterek expresszióját. Ez teszi az LLC-PK1 sejteket értékes eszközzé a vese toxikológiai vizsgálatokban. A vese toxikológiai vizsgálatokban gyakran használt másik sejtvonal az MDCK sejtvonal. Az LLC-PK1 sejtekhez hasonlóan az MDCK sejtek is epithelialisak, de jellemzőbbek a distalis tubuláris sejtekre.

Vazopresszin-, oxitocin- és prosztaglandin-receptorokat expresszálnak, amelyek stimuláció hatására aktiválják az adenilát-ciklázt. Az LLC-PK1 és az MDCK sejtvonalak gyorsan szaporodnak, és monolayer kultúrákban több generáción keresztül könnyen passziválhatók. Az LLC-PK1 sejtek képesek "kupolák", folyadékkal teli hólyagok kialakítására is, amelyek a víz- és oldottanyag-transzport, a szoros kötések és a sejtek szubsztrátumhoz való tapadása következtében jönnek létre.

Összefoglalva, az LLC-PK1 sejtvonal sokoldalú és értékes eszköz az orvosbiológiai kutatások számára. Széles körben használták a gyógyszer-metabolizmus, a gyógyszer-transzport, a gyógyszer-toxicitás, a gyógyszer-gyógyszer kölcsönhatások, a vese-toxikológia és a permeabilitási vizsgálatok különböző vizsgálataiban. Jól megalapozott epiteliális morfológiájával, valamint plazminogén-aktivátor- és citokeratin-termelésével az LLC-PK1 sejtek ideális modelljei a hámszövetnek.

Szövet
Vese
Alkalmazások
Gyógyszer-metabolizmus, permeabilitási vizsgálatok, toxicitási és kölcsönhatási vizsgálatok.
Szinonimák
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Osztályozás

Organizmus
Sertés
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
LLC-PK1 (Cytion katalógusszám: 607264)
NCBI adóazonosító szám
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
C típusú sertés onkovírus (PCOV) szekvenciákat és transzkriptumokat tartalmaz. A vírus expressziója nem zárható ki.
Termékek
Plazminogén-aktivátor

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
199-es közeg, w: 2,7 mM stabil glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820101a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 3% FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Gyűjtse össze a szuszpenziós sejteket egy 15 ml-es csőbe, és óvatosan mossa át a megtapadt sejteket kalciumot és magnéziumot nem tartalmazó PBS-szel (T25 lombik esetén 3-5 ml-t, T75 lombik esetén 5-10 ml-t használjon). Vigyen fel Accutase-t (1-2 ml-t T25 lombikokhoz, 2,5 ml-t T75 lombikokhoz), biztosítva a sejtréteg teljes lefedettségét. Hagyjuk a sejteket 10 percig szobahőmérsékleten inkubálni. Az inkubációt követően egyesítsük és centrifugáljuk a szuszpenziót és az adhezív sejteket. A centrifugálás után óvatosan reszuszpendáljuk a sejtpelletet, és a sejtszuszpenziót helyezzük át friss tápfolyadékot tartalmazó új lombikokba.
Ültetési sűrűség
1–3 x 106 sejt/cm2
Folyadékcsere
3 naponta
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
Hampshire
Az adományozó életkora
3-4 hét