LLC-PK1

LLC-PK1-solut ovat vakiintunut ja laajalti käytetty solulinja biolääketieteellisessä tutkimuksessa. Nämä solut on saatu terveestä urospuolisen sian munuaisesta, jolla on tyypillinen epiteelimorfologia. LLC-PK1-linja on polarisoitunut ja sisältää tiukkoja liitoksia, mikä tekee siitä ihanteellisen mallin epiteelikudokselle.

Yksi LLC-PK1-solujen kriittisistä ominaisuuksista on niiden kyky tuottaa plasminogeeniaktivaattoria, joka stimuloi fibrinolyysiä. Tämä ominaisuus on tehnyt LLC-PK1-soluista erityisen arvokkaita tromboositutkimuksessa.

Viime vuosina plasminogeeniaktivaattoria on sisällytetty tromboosihoidoissa käytettäviin lääkkeisiin, koska se helpottaa pienten verihyytymien liukenemista. Plasminogeeniaktivaattorin tuottamisen lisäksi LLC-PK1-solut tuottavat suuria määriä sytokeratiinia. Tämä ominaisuus on tehnyt niistä suosittuja erilaisissa farmakologisissa ja metabolisissa tutkimuksissa.

LLC-PK1-linjaa on käytetty lääkkeiden metabolian, kuljetuksen, toksisuuden ja vuorovaikutustutkimuksissa. LLC-PK1-soluja käytetään usein myös läpäisevyysmäärityksissä. Uratsiilin kuljetusmekanismi vaihtelee solulinjoista riippuen, sillä Caco-2-soluissa on basolateraalisella kalvolla Na+-riippumaton järjestelmä ja LLC-PK1-soluissa sekä Na+-riippuvainen että Na+-riippumaton järjestelmä apikaalisella kalvolla.

Muihin solulinjoihin verrattuna LLC-PK1-soluilla on monia in vivo -proksimaalisten tubulaarisolujen ominaisuuksia, kuten apikaalisen kalvon mikrovillit, apikaalisen kalvon entsyymien korkea aktiivisuus sekä parathormonireseptorien ja natriumrieriippuvaisten glukoosinsiirtimien ilmentyminen. Tämä tekee LLC-PK1-soluista arvokkaan välineen munuaistoksikologisissa tutkimuksissa. Toinen munuaistoksikologisissa tutkimuksissa yleisesti käytetty solulinja on MDCK-solulinja. LLC-PK1-solujen tavoin MDCK-solut ovat epiteelisoluja, mutta niiden ominaisuudet ovat tyypillisempiä distaalisille tubulussoluille.

Ne ilmentävät vasopressiini-, oksitosiini- ja prostaglandiinireseptoreita, jotka stimuloituina aktivoivat adenylaattisyklaasia. LLC-PK1- ja MDCK-solulinjat lisääntyvät nopeasti, ja niitä voidaan helposti kasvattaa useita sukupolvia monokerrosviljelmissä. LLC-PK1-solut kykenevät myös muodostamaan "kupoleita", nestetäytteisiä rakkuloita, jotka johtuvat veden ja liuottimien kuljetuksesta, tiiviistä liitoksista ja solujen kiinnittymisestä alustaan.

Yhteenvetona voidaan todeta, että LLC-PK1-solulinja on monipuolinen ja arvokas väline biolääketieteelliseen tutkimukseen. Sitä on käytetty laajalti erilaisissa tutkimuksissa, jotka koskevat lääkeaineiden metaboliaa, lääkeaineiden kulkeutumista, lääkeaineiden toksisuutta, lääkeaineiden ja lääkeaineiden välisiä vuorovaikutuksia, munuaistoksikologiaa ja läpäisevyyskokeita. LLC-PK1-solut ovat vakiintuneen epiteelimorfologiansa sekä plasminogeeniaktivaattorin ja sytokeratiinin tuotannon ansiosta ihanteellinen epiteelikudoksen malli.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa