LLC-PK1

Las células LLC-PK1 son una línea celular bien establecida y ampliamente utilizada en la investigación biomédica. Estas células se obtuvieron del riñón de un cerdo macho sano y presentan una morfología epitelial típica. La línea LLC-PK1 está polarizada y cuenta con uniones estrechas, lo que la convierte en un modelo ideal para el tejido epitelial.

Una de las características fundamentales de las células LLC-PK1 es su capacidad para producir activador del plasminógeno, una sustancia que estimula la fibrinólisis. Esta propiedad ha hecho que las células LLC-PK1 sean particularmente valiosas en la investigación sobre la trombosis.

En los últimos años, el activador del plasminógeno se ha incorporado a los medicamentos utilizados en las terapias contra la trombosis, ya que facilita la disolución de pequeños coágulos sanguíneos. Además de producir activadores del plasminógeno, las células LLC-PK1 producen grandes cantidades de citoqueratina. Esta característica las ha hecho populares para diversas investigaciones farmacológicas y metabólicas.

La línea LLC-PK1 se ha utilizado en estudios sobre el metabolismo, el transporte, la toxicidad y las interacciones de los fármacos. Las células LLC-PK1 también se utilizan con frecuencia en ensayos de permeabilidad. El mecanismo de transporte del uracilo varía según las líneas celulares: en las células Caco-2 existe un sistema independiente del Na+ en la membrana basolateral, mientras que en las células LLC-PK1 hay sistemas tanto dependientes como independientes del Na+ en la membrana apical.

En comparación con otras líneas celulares, las células LLC-PK1 comparten muchas características de las células tubulares proximales in vivo, incluyendo microvellosidades en la membrana apical, alta actividad de las enzimas de la membrana apical y la expresión de receptores de la hormona paratiroidea y transportadores de glucosa dependientes de sodio. Esto convierte a las células LLC-PK1 en una herramienta valiosa para los estudios de toxicología renal. Otra línea celular que se utiliza comúnmente en los estudios de toxicología renal es la línea celular MDCK. Al igual que las células LLC-PK1, las células MDCK son epiteliales, pero presentan características más propias de las células tubulares distales.

Expresan receptores de vasopresina, oxitocina y prostaglandinas, los cuales, cuando se estimulan, activan la adenilato ciclasa. Las líneas celulares LLC-PK1 y MDCK proliferan rápidamente y pueden pasarse fácilmente durante muchas generaciones en cultivos monocapa. Las células LLC-PK1 también son capaces de formar «cúpulas», ampollas llenas de líquido que resultan del transporte de agua y solutos, de las uniones estrechas y de la adhesión de las células al sustrato.

En conclusión, la línea celular LLC-PK1 es una herramienta versátil y valiosa para la investigación biomédica. Se ha utilizado ampliamente en diversos estudios sobre el metabolismo de los fármacos, el transporte de fármacos, la toxicidad de los fármacos, las interacciones fármaco-fármaco, la toxicología renal y los ensayos de permeabilidad. Gracias a su morfología epitelial bien establecida y a la producción de activador del plasminógeno y citoqueratina, las células LLC-PK1 constituyen un modelo ideal para el tejido epitelial.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.