Pereiti prie turinio
LLC-PK1
Audinys
Inkstai
Sinonimai
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

Dokumentai

LLC-PK1

Cell line · Prekės numeris 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

LLC-PK1 ląstelės yra gerai žinoma ir biomedicininiuose tyrimuose plačiai naudojama ląstelių linija. Šios ląstelės buvo gautos iš sveiko kiaulės patino inksto, pasižyminčio tipiška epitelio morfologija. LLC-PK1 linija yra poliarizuota ir turi sandarias jungtis, todėl yra idealus epitelinio audinio modelis.

Vienas iš svarbiausių LLC-PK1 ląstelių bruožų yra jų gebėjimas gaminti plazminogeno aktyvatorių - medžiagą, skatinančią fibrinolizę. Dėl šios savybės LLC-PK1 ląstelės tapo ypač vertingos atliekant trombozės tyrimus.

Pastaraisiais metais plazminogeno aktyvatorius buvo įtrauktas į trombozės gydymui naudojamų vaistų sudėtį, nes jis palengvina mažų kraujo krešulių tirpimą. LLC-PK1 ląstelės ne tik gamina plazminogeno aktyvatorius, bet ir didelį kiekį citokeratino. Dėl šios savybės jos tapo populiarios atliekant įvairius farmakologinius ir metabolinius tyrimus.

LLC-PK1 linija buvo naudojama vaistų metabolizmo, pernašos, toksiškumo ir sąveikos tyrimams. LLC-PK1 ląstelės taip pat dažnai naudojamos pralaidumo tyrimams. Uracilo pernašos mechanizmas skiriasi priklausomai nuo ląstelių linijų: Caco-2 ląstelėse veikia nuo Na+ nepriklausoma sistema bazolateralinėje membranoje, o LLC-PK1 ląstelėse - ir nuo Na+ priklausoma, ir nuo Na+ nepriklausoma sistemos apikalinėje membranoje.

Palyginti su kitomis ląstelių linijomis, LLC-PK1 ląstelėms būdinga daugelis proksimalinių kanalėlių ląstelių in vivo požymių, įskaitant apikalinės membranos mikroelementus, didelį apikalinės membranos fermentų aktyvumą, paratiroidinių hormonų receptorių ir nuo natrio priklausomų gliukozės pernešėjų raišką. Todėl LLC-PK1 ląstelės yra vertingas įrankis inkstų toksikologijos tyrimams. Kita inkstų toksikologiniams tyrimams dažnai naudojama ląstelių linija yra MDCK ląstelių linija. Kaip ir LLC-PK1 ląstelės, MDCK ląstelės yra epitelinės, tačiau pasižymi savybėmis, labiau būdingomis distalinių kanalėlių ląstelėms.

Jos ekspresuoja vazopresino, oksitocino ir prostaglandinų receptorius, kurie stimuliuojami aktyvuoja adenilatciklazę. LLC-PK1 ir MDCK ląstelių linijos greitai dauginasi ir gali būti lengvai dauginamos daug kartų viensluoksnėse kultūrose. LLC-PK1 ląstelės taip pat gali formuoti "kupolus", skysčio pripildytas pūsles, susidarančias dėl vandens ir tirpalų pernešimo, sandarių jungčių ir ląstelių sukibimo su substratu.

Apibendrinant galima teigti, kad LLC-PK1 ląstelių linija yra universali ir vertinga biomedicininių tyrimų priemonė. Ji plačiai naudojama atliekant įvairius vaistų metabolizmo, vaistų pernašos, toksiškumo, vaistų ir vaistų sąveikos, inkstų toksikologijos ir pralaidumo tyrimus. LLC-PK1 ląstelės yra idealus epitelinio audinio modelis, nes jos pasižymi gerai nusistovėjusia epitelio morfologija, plazminogeno aktyvatoriaus ir citokeratino gamyba.

Audinys
Inkstai
Paraiškos
Vaistų metabolizmo, pralaidumo tyrimai, toksiškumo ir sąveikos tyrimai.
Sinonimai
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Klasifikacija

Organizmas
Kiaulė
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus

04Identifikatoriai

Nuoroda
LLC-PK1 (Cytion katalogo numeris 607264)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Išraiška ir jautrumas

Virusai
Sudėtyje yra kiaulių C tipo onkoviruso (PCOV) sekų ir transkriptų. Viruso raiškos negalima atmesti.
Produktai
Plazminogeno aktyvatorius

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
Terpė 199, w: 2,7 mM stabilus glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion straipsnio numeris 820101a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 3 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Surinkite ląstelių suspensiją į 15 ml mėgintuvėlį ir švelniai nuplaukite prilipusias ląsteles PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio (naudokite 3-5 ml T25 kolboms ir 5-10 ml T75 kolboms). Užtepkite "Accutase" (1-2 ml T25 kolboms, 2,5 ml T75 kolboms), kad visiškai padengtumėte ląstelių sluoksnį. Leiskite ląstelėms 10 minučių inkubuotis kambario temperatūroje. Po inkubacijos sumaišykite ir centrifuguokite suspensiją ir prilipusias ląsteles. Po centrifugavimo atsargiai resuspenduokite ląstelių granules ir perkelkite ląstelių suspensiją į naujas kolbas su šviežia terpe.
Sėjos tankis
1–3 x 106 ląstelių/cm2
Skysčių atnaujinimas
Kas 3 dienas
Atkūrimas po atšilimo
Atšildžius, išdėliokite ląsteles 5 x 104 ląstelių/cm2 tankumu ir leiskite ląstelėms atsigauti po užšaldymo proceso ir prisitvirtinti bent 24 valandas.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
Hampšyras
Donoro amžius
3-4 savaitės