Skip to content
LLC-PK1
Tissue
Thận
Synonyms
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

Documents

LLC-PK1

Cell line · Product number 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào LLC-PK1 là một dòng tế bào được sử dụng rộng rãi và đã được xác lập vững chắc trong nghiên cứu y sinh. Các tế bào này được phân lập từ thận của một con lợn đực khỏe mạnh, có hình thái biểu mô điển hình. Dòng tế bào LLC-PK1 có tính phân cực và chứa các liên kết chặt chẽ, khiến nó trở thành mô hình lý tưởng cho mô biểu mô.

Một trong những đặc điểm quan trọng của tế bào LLC-PK1 là khả năng sản xuất activator plasminogen, một chất kích thích quá trình phân giải fibrin. Tính chất này đã khiến tế bào LLC-PK1 trở nên đặc biệt hữu ích trong nghiên cứu về huyết khối.

Trong những năm gần đây, plasminogen activator đã được đưa vào các loại thuốc dùng trong điều trị huyết khối vì nó giúp tan rã các cục máu đông nhỏ. Ngoài việc sản xuất plasminogen activator, các tế bào LLC-PK1 còn sản xuất lượng lớn cytokeratin. Tính chất này đã khiến chúng trở nên phổ biến trong các nghiên cứu dược lý và chuyển hóa.

Dòng tế bào LLC-PK1 được sử dụng trong các nghiên cứu về chuyển hóa thuốc, vận chuyển, độc tính và tương tác. Tế bào LLC-PK1 cũng thường được sử dụng trong các thử nghiệm độ thấm. Cơ chế vận chuyển uracil khác nhau tùy thuộc vào dòng tế bào, với hệ thống không phụ thuộc Na+ trên màng basolateral ở tế bào Caco-2 và cả hệ thống phụ thuộc Na+ và không phụ thuộc Na+ trên màng apical ở tế bào LLC-PK1.

So với các dòng tế bào khác, tế bào LLC-PK1 có nhiều đặc điểm tương tự như tế bào ống thận gần trong cơ thể sống, bao gồm vi lông trên màng apical, hoạt động cao của enzym trên màng apical, và biểu hiện thụ thể hormone tuyến giáp và vận chuyển glucose phụ thuộc natri. Điều này khiến tế bào LLC-PK1 trở thành công cụ quý giá trong các nghiên cứu độc tính thận. Một dòng tế bào khác thường được sử dụng trong các nghiên cứu độc tính thận là dòng tế bào MDCK. Giống như tế bào LLC-PK1, tế bào MDCK là tế bào biểu mô nhưng có các đặc điểm điển hình hơn của tế bào ống thận xa.

Chúng biểu hiện các thụ thể vasopressin, oxytocin và prostaglandin, khi được kích thích sẽ kích hoạt adenylate cyclase. Các dòng tế bào LLC-PK1 và MDCK phát triển nhanh chóng và có thể được nuôi cấy nhiều thế hệ trong môi trường nuôi cấy lớp đơn. Tế bào LLC-PK1 cũng có khả năng hình thành "domes", các bọng nước chứa dịch do quá trình vận chuyển nước và chất tan, các liên kết chặt chẽ và sự bám dính của tế bào vào nền.

Tóm lại, dòng tế bào LLC-PK1 là một công cụ đa năng và có giá trị cho nghiên cứu y sinh. Nó đã được sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu về chuyển hóa thuốc, vận chuyển thuốc, độc tính thuốc, tương tác thuốc-thuốc, độc tính thận và các thử nghiệm độ thấm. Với hình thái biểu mô được thiết lập tốt và sản xuất activator plasminogen và cytokeratin, tế bào LLC-PK1 là mô hình lý tưởng cho mô biểu mô.

Tissue
Thận
Applications
Chuyển hóa thuốc, thử nghiệm độ thấm, độc tính và nghiên cứu tương tác.
Synonyms
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Classification

Organism
Pig
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô

04Identifiers

Citation
LLC-PK1 (Số catalog Cytion 607264)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Expression and susceptibility

Viruses
Chứa các trình tự và bản sao của virus ung thư lợn loại C (PCOV). Không thể loại trừ khả năng virus được biểu hiện.
Products
Chất hoạt hóa plasminogen

06Handling and culture

Culture medium
Phương tiện 199, chứa: 2,7 mM glutamine ổn định, chứa: 2,2 g/L NaHCO₃, chứa: EBSS (Số hiệu sản phẩm Cytion 820101a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 3% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Thu thập các tế bào treo lơ lửng vào ống 15 ml và nhẹ nhàng rửa các tế bào bám dính bằng PBS không chứa canxi và magiê (sử dụng 3-5 ml cho bình T25 và 5-10 ml cho bình T75). Áp dụng Accutase (1-2 ml cho bình T25, 2,5 ml cho bình T75) đảm bảo phủ đều lớp tế bào. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 10 phút. Sau khi ủ, trộn và ly tâm cả tế bào treo lơ lửng và tế bào bám dính. Sau khi ly tâm, nhẹ nhàng hòa tan lại khối tế bào và chuyển hỗn hợp tế bào vào bình mới chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 đến 3 × 10⁶ tế bào/cm²
Fluid renewal
Mỗi 3 ngày
Post-thaw recovery
Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
Hampshire
Donor age
3-4 tuần