Mine otse sisu juurde
LLC-PK1
Kude
Neerud
Sünonüümid
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

Dokumendid

LLC-PK1

Cell line · Toote number 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

LLC-PK1 rakud on biomeditsiinilistes uuringutes hästi tuntud ja laialdaselt kasutatav rakuliin. Need rakud on saadud terve isase sea neerudest, millel on tüüpiline epiteeli morfoloogia. LLC-PK1 liin on polariseeritud ja sisaldab tihedaid ühendusi, mis muudab selle ideaalseks epiteelkoe mudeliks.

LLC-PK1 rakkude üks kriitilisi omadusi on nende võime toota plasminogeeni aktivaatorit, mis stimuleerib fibrinolüüsi. See omadus on muutnud LLC-PK1 rakud eriti väärtuslikuks tromboosiuuringutes.

Viimastel aastatel on plasminogeeni aktivaator lisatud tromboosiravis kasutatavate ravimite hulka, kuna see hõlbustab väikeste verehüüvete lahustamist. Lisaks plasminogeeni aktivaatorite tootmisele toodavad LLC-PK1 rakud suures koguses tsütokeratiini. See omadus on muutnud nad populaarseks erinevate farmakoloogiliste ja ainevahetuse uuringute jaoks.

LLC-PK1 liini on kasutatud ravimite metabolismi, transpordi, toksilisuse ja koostoime uuringutes. LLC-PK1 rakke kasutatakse sageli ka läbilaskvusuuringutes. Uratsiili transportimise mehhanism erineb sõltuvalt rakuliinist, kusjuures Caco-2 rakkudel on basolateraalsel membraanil Na+-independentne süsteem ja LLC-PK1 rakkudel nii Na+- sõltuv kui ka Na+-independentne süsteem apikaalsel membraanil.

Võrreldes teiste rakuliinidega on LLC-PK1 rakkudel mitmeid proksimaalsete tubulaarsete rakkude omadusi in vivo, sealhulgas apikaalmembraani mikrovillide, apikaalmembraani ensüümide kõrge aktiivsus ning parathormooni retseptorite ja naatriumisõltuvate glükoositransporterite ekspressioon. See muudab LLC-PK1 rakud väärtuslikuks vahendiks neerutoksikoloogilistes uuringutes. Teine rakuliin, mida tavaliselt kasutatakse neerutoksikoloogia uuringutes, on MDCK rakuliin. Nagu LLC-PK1 rakud, on ka MDCK rakud epiteelirakud, kuid nende omadused on iseloomulikumad distaalsetele tubulaarsetele rakkudele.

Nad ekspresseerivad vasopressiini, oksütotsiini ja prostaglandiini retseptoreid, mis stimuleerimisel aktiveerivad adenülaatsüklaasi. LLC-PK1 ja MDCK rakuliinid paljunevad kiiresti ja neid saab monokihilistes kultuurides kergesti paljundada paljude põlvkondade kaupa. LLC-PK1 rakud on samuti võimelised moodustama "kupleid", vedelikuga täidetud villid, mis tulenevad vee ja lahustunud ainete transpordist, tihedatest ühendustest ja rakkude adhesiivsusest substraadi külge.

Kokkuvõttes on LLC-PK1 rakuliin mitmekülgne ja väärtuslik vahend biomeditsiiniliste uuringute jaoks. Seda on laialdaselt kasutatud mitmesugustes uuringutes, mis käsitlevad ravimite metabolismi, ravimite transporti, ravimite toksilisust, ravimite ja ravimite vastastikmõju, neerutoksikoloogiat ja läbilaskvusuuringuid. LLC-PK1 rakud on tänu oma väljakujunenud epiteeli morfoloogiale ning plasminogeeni aktivaatori ja tsütokeratiini tootmisele ideaalne mudel epiteelkoe jaoks.

Kude
Neerud
Rakendused
Ravimite metabolism, läbilaskvusuuringud, toksilisuse ja koostoimete uuringud.
Sünonüümid
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Klassifikatsioon

Organism
Siga
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed

04Tunnused

Viide
LLC-PK1 (Cytioni katalooginumber 607264)
NCBI maksukood
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Sisaldab sigade C-tüüpi onkoviiruse (PCOV) järjestusi ja transkripte. Viiruse ekspressiooni ei saa välistada.
Tooted
Plasminogeeni aktivaator

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Keskkond 199, w: 2,7 mM stabiilne glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820101a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada keskkonda 3% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
1 kuni 3 x 106 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
Iga 3 päeva tagant
Taastumine pärast sulamist
Pärast sulatamist asetage rakud plaadile tihedusega 5 x 104 rakku/cm2 ja laske rakkudel külmutamisprotsessist taastuda ja kinnituda vähemalt 24 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
Hampshire
Doonori vanus
3-4 nädalat