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LLC-PK1
ティッシュ
腎臓
同義語
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

LLC-PK1

Cell line · 製品番号 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

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01概要

説明

LLC-PK1細胞は、生物医学研究において確立され、広く使用されている細胞株である。これらの細胞は健康な雄ブタの腎臓に由来し、典型的な上皮形態を示す。LLC-PK1株は極性を持ち、タイトジャンクションを含むため、上皮組織の理想的なモデルとなっている。

LLC-PK1細胞の重要な特徴の一つは、線溶を刺激する物質であるプラスミノーゲンアクチベーターを産生する能力である。この性質により、LLC-PK1細胞は血栓症研究において特に貴重な存在となっている。

近年、プラスミノーゲンアクチベーターは小さな血栓の溶解を促進するため、血栓症治療薬に配合されている。LLC-PK1細胞はプラスミノーゲン活性化因子を産生することに加え、大量のサイトケラチンを産生する。この特性は、様々な薬理学的および代謝学的研究において、LLC-PK1細胞の人気を高めている。

LLC-PK1株は薬物代謝、輸送、毒性、相互作用の研究に用いられてきた。LLC-PK1細胞はまた、透過性アッセイにも頻繁に使用されている。ウラシルの輸送機構は細胞株によって異なり、Caco-2細胞では基底膜上のNa+非依存性系、LLC-PK1細胞ではアピカル膜上のNa+依存性系とNa+非依存性系の両方が存在する。

他の細胞株と比較して、LLC-PK1細胞は、アピカル膜の微絨毛、アピカル膜酵素の高活性、副甲状腺ホルモンレセプターやNa依存性グルコーストランスポーターの発現など、生体内の近位尿細管細胞の多くの特徴を共有している。このことから、LLC-PK1細胞は腎毒性研究の貴重なツールとなっている。腎毒性研究によく使われるもう一つの細胞株はMDCK細胞株である。LLC-PK1細胞と同様、MDCK細胞は上皮細胞であるが、より遠位尿細管細胞に典型的な性質を持つ。

MDCK細胞はバソプレシン、オキシトシン、プロスタグランジン受容体を発現しており、刺激されるとアデニル酸シクラーゼを活性化する。LLC-PK1およびMDCK細胞株は急速に増殖し、単層培養で何世代にもわたって容易に継代できる。LLC-PK1細胞はまた、水と溶質の輸送、タイトジャンクション、細胞の基質への接着から生じる「ドーム」、液体で満たされた水疱を形成することができる。

結論として、LLC-PK1細胞株は生物医学研究のための多用途で貴重なツールである。LLC-PK1細胞株は、薬物代謝、薬物輸送、薬物毒性、薬物-薬物相互作用、腎毒性、透過性アッセイなどに関する様々な研究に広く用いられてきた。確立された上皮形態とプラスミノーゲン活性化因子およびサイトケラチンの産生を持つLLC-PK1細胞は、上皮組織の理想的なモデルである。

ティッシュ
腎臓
用途
薬物代謝、透過性アッセイ、毒性、相互作用試験。
同義語
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02分類

生物
ブタ
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様

04識別子

引用
LLC-PK1 (Cytion カタログ番号 607264)
NCBI 納税者番号
9823
セロサウルス
CVCL_0391

05発現と感受性

ウイルス
Porcine type-C oncovirus (PCOV)の配列と転写産物を含む。ウイルス発現を排除することはできない。
製品
プラスミノーゲン活性化因子

06取り扱いと飼育

培地
199培地、w:2.7mM安定グルタミン、w:2.2g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820101a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に3% FBSを添加する
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
浮遊細胞を15 mlチューブに集め、カルシウムとマグネシウムを欠いたPBSで付着細胞を穏やかに洗浄する(T25フラスコでは3~5 ml、T75フラスコでは5~10 mlを使用)。アキュターゼ(T25フラスコでは1-2 ml、T75フラスコでは2.5 ml)を、細胞層を完全に覆うように塗布する。細胞を室温で10分間インキュベートする。インキュベーション後、懸濁液と接着細胞の両方を合わせて遠心する。遠心後、細胞ペレットを注意深く懸濁し、細胞懸濁液を新しい培地の入った新しいフラスコに移す。
播種密度
1~3×10⁶細胞/cm²
流体の更新
3日ごと
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
ハンプシャー
ドナーの年齢
3~4週間