Skip to content
LLC-PK1
Tissue
כליה
Synonyms
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

Documents

LLC-PK1

Cell line · Product number 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

תאי LLC-PK1 הם קו תאים מבוסס ומוכר הנמצא בשימוש נרחב במחקר ביו-רפואי. תאים אלה נגזרו מכליות של חזיר זכר בריא, והם מציגים מורפולוגיה אפיתלית טיפוסית. קו התאים LLC-PK1 הוא קוטבי ומכיל חיבורים הדוקים, מה שהופך אותו למודל אידיאלי לרקמת אפיתל.

אחת התכונות החשובות של תאי LLC-PK1 היא יכולתם לייצר מפעיל פלסמינוגן, חומר המגרה פיברינוליזה. תכונה זו הפכה את תאי LLC-PK1 ליקרים במיוחד במחקר על פקקת.

בשנים האחרונות, מפעיל פלסמינוגן נכלל בתרופות המשמשות לטיפול בפקקת, מכיוון שהוא מסייע בפירוק קרישי דם קטנים. בנוסף לייצור מפעילים פלסמינוגנים, תאי LLC-PK1 מייצרים כמויות גדולות של ציטוקראטין. תכונה זו הפכה אותם לפופולריים במחקרים פרמקולוגיים ומטבוליים שונים.

קו LLC-PK1 שימש במחקרים על מטבוליזם, הובלה, רעילות ואינטראקציה של תרופות. תאי LLC-PK1 משמשים גם לעתים קרובות בבדיקות חדירות. מנגנון הובלת האורציל שונה בהתאם לקווי התאים, עם מערכת בלתי תלויה ב-Na+ בקרום הבזולטרלי בתאי Caco-2 ומערכות תלויות Na+ ובלתי תלויות Na+ בקרום האפיטי בתאי LLC-PK1.

בהשוואה לקווי תאים אחרים, תאי LLC-PK1 חולקים מאפיינים רבים של תאי צינור פרוקסימליים in vivo, כולל מיקרו-וילי על הממברנה האפיקלית, פעילות גבוהה של אנזימי הממברנה האפיקלית וביטוי של קולטני הורמון יותרת התריס ומובילי גלוקוז תלויי נתרן. זה הופך את תאי LLC-PK1 לכלי חשוב במחקרים טוקסיקולוגיים של הכליות. קו תאים נוסף הנפוץ במחקרים בתחום הטוקסיקולוגיה הכלייתית הוא קו התאים MDCK. כמו תאי LLC-PK1, תאי MDCK הם תאים אפיתל, אך הם בעלי מאפיינים האופייניים יותר לתאים צינוריים דיסטליים.

הם מבטאים קולטני וזופרסין, אוקסיטוצין ופרוסטגלנדין, אשר כאשר הם מגורים, מפעילים אדנילט ציקלאז. קווי התאים LLC-PK1 ו-MDCK מתרבים במהירות וניתן להעבירם בקלות לדורות רבים בתרבויות חד-שכבתיות. תאי LLC-PK1 מסוגלים גם ליצור 'כיפות', שלפוחיות מלאות בנוזל הנוצרות כתוצאה מהובלת מים וממסים, חיבורים הדוקים והידבקות התאים למצע.

לסיכום, קו התאים LLC-PK1 הוא כלי רב-תכליתי ויקר ערך למחקר ביו-רפואי. הוא נמצא בשימוש נרחב במחקרים שונים על מטבוליזם של תרופות, הובלת תרופות, רעילות תרופות, אינטראקציות בין תרופות, טוקסיקולוגיה כלית ובדיקות חדירות. עם המורפולוגיה האפיתלית המוכחת שלו וייצור פלסמינוגן אקטיベーター וציטוקראטין, תאי LLC-PK1 הם מודל אידיאלי לרקמת אפיתל.

Tissue
כליה
Applications
מטבוליזם של תרופות, בדיקות חדירות, רעילות ומחקרי אינטראקציה.
Synonyms
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Classification

Organism
Pig
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל

04Identifiers

Citation
LLC-PK1 (מספר קטלוגי Cytion 607264)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Expression and susceptibility

Viruses
מכיל רצפים ותמלילים של נגיף סרטן מסוג C בחזירים (PCOV). לא ניתן לשלול ביטוי של הנגיף.
Products
מפעיל פלסמינוגן

06Handling and culture

Culture medium
מדיום 199, w: 2.7 mM גלוטמין יציב, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820101a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 3% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
אסוף את תאי התרחיף בצינור של 15 מ"ל ושטוף בעדינות את התאים הנצמדים עם PBS ללא סידן ומגנזיום (השתמש ב-3-5 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-5-10 מ"ל עבור בקבוקי T75). החל Accutase (1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25, 2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75) תוך הקפדה על כיסוי מלא של שכבת התאים. אפשר לתאים להתפתח בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות. לאחר ההתפתחות, שלב וצנטריפוג את התאים המרחפים והדבוקים. לאחר הצנטריפוגה, השב בזהירות את משקע התאים והעבר את תמיסת התאים לבקבוקים חדשים המכילים מדיום טרי.
Seeding density
1 עד 3 x 106 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
כל 3 ימים
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
המפשייר
Donor age
3-4 שבועות