Gå direkt till innehållet
LLC-PK1
Vävnad
Njurar
Synonymer
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

LLC-PK1

Cell line · Produktnummer 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

LLC-PK1-celler är en väletablerad och allmänt använd cellinje inom biomedicinsk forskning. Dessa celler härrör från en frisk grisnjure från en hane och uppvisar typisk epitelmorfologi. LLC-PK1-linjen är polariserad och innehåller tight junctions, vilket gör den till en idealisk modell för epitelvävnad.

En av de viktigaste egenskaperna hos LLC-PK1-cellerna är deras förmåga att producera plasminogenaktivator, ett ämne som stimulerar fibrinolys. Denna egenskap har gjort LLC-PK1-cellerna särskilt värdefulla inom trombosforskningen.

På senare år har plasminogenaktivator inkluderats i läkemedel som används vid trombosbehandlingar eftersom det underlättar upplösningen av små blodproppar. Förutom att producera plasminogenaktivatorer producerar LLC-PK1-celler stora mängder cytokeratin. Denna egenskap har gjort dem populära för olika farmakologiska och metaboliska forskningsundersökningar.

LLC-PK1-linjen har använts i studier av läkemedelsmetabolism, transport, toxicitet och interaktion. LLC-PK1-celler används också ofta i permeabilitetsanalyser. Mekanismen för uraciltransport skiljer sig åt beroende på cellinje, med ett Na+-oberoende system på det basolaterala membranet i Caco-2-celler och både Na+-beroende och Na+-oberoende system på det apikala membranet i LLC-PK1-celler.

Jämfört med andra cellinjer delar LLC-PK1-celler många egenskaper hos proximala tubulära celler in vivo, inklusive mikrovilli i det apikala membranet, höga aktiviteter hos enzymer i det apikala membranet och uttryck av receptorer för parathormon och natriumberoende glukostransportörer. Detta gör LLC-PK1-celler till ett värdefullt verktyg i njurtoxikologiska studier. En annan cellinje som ofta används i njurtoxikologiska studier är MDCK-cellinjen. Liksom LLC-PK1-cellerna är MDCK-cellerna epiteliala men har egenskaper som är mer typiska för distala tubulära celler.

De uttrycker vasopressin-, oxytocin- och prostaglandinreceptorer som, när de stimuleras, aktiverar adenylatcyklas. LLC-PK1- och MDCK-cellinjerna sprider sig snabbt och kan lätt passeras i många generationer i monolagerkulturer. LLC-PK1-celler kan också bilda "domes", vätskefyllda blåsor som uppstår genom transport av vatten och lösta ämnen, tight junctions och cellernas vidhäftning till underlaget.

Sammanfattningsvis är cellinjen LLC-PK1 ett mångsidigt och värdefullt verktyg för biomedicinsk forskning. Den har använts i stor utsträckning i olika studier av läkemedelsmetabolism, läkemedelstransport, läkemedelstoxicitet, läkemedelsinteraktioner, njurtoxikologi och permeabilitetsanalyser. Med sin väletablerade epitelmorfologi och produktion av plasminogenaktivator och cytokeratin är LLC-PK1-celler en idealisk modell för epitelvävnad.

Vävnad
Njurar
Ansökningar
Läkemedelsmetabolism, permeabilitetsanalyser, toxicitet och interaktionsstudier.
Synonymer
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Klassificering

Organism
Gris
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
LLC-PK1 (Cytion katalognummer 607264)
NCBI-skattenummer
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Uttryck och mottaglighet

Virus
Innehåller sekvenser och transkript från Porcine type-C oncovirus (PCOV). Virusuttryck kan inte uteslutas.
Produkter
Plasminogenaktivator

06Hantering och odling

Odlingsmedium
Medium 199, w: 2,7 mM stabilt glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820101a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 3% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Samla de suspenderade cellerna i ett 15 ml rör och tvätta försiktigt de vidhäftande cellerna med PBS utan kalcium och magnesium (använd 3-5 ml för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar). Applicera Accutase (1-2 ml för T25-kolvar, 2,5 ml för T75-kolvar) och se till att cellskiktet täcks helt. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 10 minuter. Efter inkubationen, kombinera och centrifugera både suspensionen och de vidhäftande cellerna. Efter centrifugering, resuspendera försiktigt cellpelleten och överför cellsuspensionen till nya kolvar med nytt medium.
Såtäthet
1 till 3 x 106 celler/cm2
Vätskeförnyelse
Var 3:e dag
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
Hampshire
Donatorns ålder
3-4 veckor