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LLC-PK1
Tissue
腎臟
Synonyms
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

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LLC-PK1

Cell line · Product number 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

US$395.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

LLC-PK1 細胞是生物醫學研究中已確立且廣泛應用的細胞系。這些細胞源自一頭健康雄性豬的腎臟,呈現典型的上皮形態。LLC-PK1 細胞系具有極性並含有緊密連接,使其成為研究上皮組織的理想模型。

LLC-PK1 細胞的一項關鍵特徵,在於其能夠產生纖溶酶原活化劑——這是一種能刺激纖維蛋白溶解的物質。這項特性使 LLC-PK1 細胞在血栓形成研究中具有特別重要的價值。

近年來,由於纖溶酶原激活劑能促進小型血栓的溶解,因此已被納入用於血栓治療的藥物中。除了產生纖溶酶原激活劑外,LLC-PK1 細胞還會大量產生細胞角蛋白。這項特性使其在各類藥理學與代謝學研究中廣受青睞。

LLC-PK1細胞系已被應用於藥物代謝、轉運、毒性及藥物相互作用研究。LLC-PK1細胞亦常被用於滲透性檢測。 尿嘧啶轉運的機制因細胞系而異:Caco-2 細胞的基底側膜上存在鈉離子(Na+)非依賴性系統,而 LLC-PK1 細胞的頂端膜上則同時存在鈉離子依賴性與非依賴性系統。

相較於其他細胞系,LLC-PK1 細胞具備許多與體內近端腎小管細胞相似的特徵,包括頂端膜微絨毛、頂端膜酶的高活性,以及副甲狀腺激素受體和鈉依賴性葡萄糖轉運蛋白的表達。這使得 LLC-PK1 細胞成為腎毒理學研究中極具價值的工具。 另一種常見於腎毒理學研究的細胞系是 MDCK 細胞系。與 LLC-PK1 細胞類似,MDCK 細胞雖屬上皮細胞,但其特徵更接近遠端腎小管細胞。

它們表達加壓素、催產素及前列腺素受體,當受到刺激時,這些受體會活化腺苷酸環化酶。LLC-PK1 和 MDCK 細胞系增殖迅速,且可在單層培養中輕鬆傳代多次。 LLC-PK1 細胞還能夠形成「穹頂」——這是一種因水和溶質轉運、緊密連接以及細胞與基質的黏附作用而形成的充滿液體的水泡。

總而言之,LLC-PK1 細胞系是生物醫學研究中一種多功能且有價值的工具。它已被廣泛應用於藥物代謝、藥物轉運、藥物毒性、藥物相互作用、腎毒理學以及通透性檢測等各項研究中。 憑藉其成熟的上皮形態,以及能產生纖溶酶原激活劑和細胞角蛋白,LLC-PK1 細胞是上皮組織的理想模型。

Tissue
腎臟
Applications
藥物代謝、滲透性檢測、毒性及藥物相互作用研究。
Synonyms
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Classification

Organism
Pig
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
上皮樣

04Identifiers

Citation
LLC-PK1(Cytion 型號 607264)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Expression and susceptibility

Viruses
含有豬C型腫瘤病毒(PCOV)的序列及轉錄本。無法排除病毒表達的可能性。
Products
纖溶酶原活化劑

06Handling and culture

Culture medium
培養基 199,含:2.7 mM 穩定谷氨酰胺,含:2.2 g/L NaHCO₃,含:EBSS(Cytion 產品編號 820101a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 3% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
將懸浮細胞收集至 15 毫升試管中,並用不含鈣和鎂的 PBS 輕柔地洗滌貼壁細胞(T25 培養瓶使用 3-5 毫升,T75 培養瓶使用 5-10 毫升)。 加入 Accutase(T25 培養瓶使用 1–2 毫升,T75 培養瓶使用 2.5 毫升),確保完全覆蓋細胞層。讓細胞於室溫下孵育 10 分鐘。 孵育完成後,將懸浮細胞與貼壁細胞合併並進行離心。離心後,小心地將細胞沉澱重新懸浮,並將細胞懸液轉移至裝有新鮮培養基的新培養瓶中。
Seeding density
1 至 3 × 10⁶ 個細胞/cm²
Fluid renewal
每 3 天
Post-thaw recovery
解凍後,將細胞以 5 × 10⁴ 個細胞/cm² 的密度接種於培養皿中,並讓細胞從冷凍過程中恢復,並附著至少 24 小時。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法,排除支原體污染的可能性。

為確保無細菌、真菌或酵母菌污染,每日均會對細胞培養物進行目視檢查。

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基(含 FBS)+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率,或使用 CM-1 (Cytion 型號 800100),該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑,可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Breed / subspecies
漢普郡
Donor age
3至4週