Skip to content
LLC-PK1
Tissue
ไต
Synonyms
LLC-PK(1), LLC-PK-1, LLC PK-1, LLc-PK1, LLC PK1, LLCPK1, Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

Documents

LLC-PK1

Cell line · Product number 607264

LLC-PK1 cells are a well-established and widely used cell line in biomedical research. These cells were derived from a healthy male pig's kidney, exhi...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ LLC-PK1 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางและใช้กันอย่างแพร่หลายในงานวิจัยทางชีวการแพทย์ เซลล์เหล่านี้ถูกแยกมาจากไตของสุกรเพศผู้ที่มีสุขภาพดี โดยแสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวอย่างชัดเจน สายพันธุ์ LLC-PK1 มีลักษณะโพลาไรซ์และมีรอยต่อที่แน่นหนา ทำให้เป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับเนื้อเยื่อเยื่อบุผิว

หนึ่งในคุณสมบัติที่สำคัญของเซลล์ LLC-PK1 คือความสามารถในการผลิตพลาสมินเจนแอคติเวเตอร์ ซึ่งเป็นสารที่กระตุ้นการสลายตัวของไฟบริน คุณสมบัตินี้ทำให้เซลล์ LLC-PK1 มีคุณค่าอย่างยิ่งในการวิจัยเกี่ยวกับภาวะลิ่มเลือดอุดตัน

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา โปรตีนไคเมอริกที่กระตุ้นพลาสมินเจนได้ถูกนำมาใช้ในยาสำหรับการรักษาภาวะลิ่มเลือดอุดตัน เนื่องจากช่วยในการสลายลิ่มเลือดขนาดเล็ก นอกจากการผลิตโปรตีนไคเมอริกที่กระตุ้นพลาสมินเจนแล้ว เซลล์ LLC-PK1 ยังผลิตไซโตเคราตินในปริมาณมากอีกด้วย ลักษณะนี้ทำให้เซลล์ดังกล่าวได้รับความนิยมในการวิจัยทางเภสัชวิทยาและเมตาบอลิซึมต่าง ๆ

สายพันธุ์ LLC-PK1 ถูกนำมาใช้ในการศึกษาการเผาผลาญยา การขนส่ง ความเป็นพิษ และการศึกษาปฏิสัมพันธ์ของยา เซลล์ LLC-PK1 ยังถูกใช้บ่อยในการทดสอบการซึมผ่านของสาร กลไกการขนส่งยูราซิลแตกต่างกันไปตามสายพันธุ์ของเซลล์ โดยในระบบเซลล์ Caco-2 มีระบบที่ไม่ขึ้นกับ Na+ บนเยื่อหุ้มเซลล์ด้านฐานและด้านข้าง และในระบบเซลล์ LLC-PK1 มีทั้งระบบที่ขึ้นกับ Na+ และระบบที่ไม่ขึ้นกับ Na+ บนเยื่อหุ้มเซลล์ด้านยอด

เมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ไลน์อื่น ๆ เซลล์ LLC-PK1 มีลักษณะหลายประการที่คล้ายกับเซลล์ท่อไตส่วนต้นในร่างกาย รวมถึงมีไมโครวิลไลที่เยื่อหุ้มเซลล์ด้านปลาย มีกิจกรรมของเอนไซม์ที่เยื่อหุ้มเซลล์ด้านปลายสูง และมีการแสดงออกของตัวรับฮอร์โมนพาราไทรอยด์และตัวขนส่งกลูโคสที่ขึ้นกับโซเดียม สิ่งนี้ทำให้เซลล์ LLC-PK1 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาพิษวิทยาของไตอีกสายพันธุ์เซลล์ที่มักใช้ในการศึกษาพิษวิทยาของไตคือสายพันธุ์เซลล์ MDCK เช่นเดียวกับเซลล์ LLC-PK1 เซลล์ MDCK เป็นเซลล์เยื่อบุผิวแต่มีลักษณะที่คล้ายกับเซลล์ท่อไตส่วนปลายมากกว่า

พวกเขาแสดงตัวรับของวาโซเพรสซิน ออกซิโทซิน และพรอสตาแกลนดิน ซึ่งเมื่อถูกกระตุ้นจะกระตุ้นอะดีนิเลตไซเคลส เซลล์ไลน์ LLC-PK1 และ MDCK แพร่พันธุ์อย่างรวดเร็วและสามารถเพาะเลี้ยงเป็นรุ่นได้หลายรุ่นในวัฒนธรรมชั้นเดียวเซลล์ LLC-PK1 ยังสามารถสร้าง 'โดม' ซึ่งเป็นตุ่มน้ำที่เต็มไปด้วยของเหลวที่เกิดจากการขนส่งน้ำและสารละลาย การเชื่อมต่อที่แน่นหนา และการยึดเกาะของเซลล์กับพื้นผิว

โดยสรุปแล้ว สายเซลล์ LLC-PK1 เป็นเครื่องมือที่หลากหลายและมีคุณค่าสำหรับการวิจัยทางชีวการแพทย์ มันถูกใช้อย่างแพร่หลายในงานวิจัยต่างๆ เกี่ยวกับการเผาผลาญยา การขนส่งยา ความเป็นพิษของยา การโต้ตอบระหว่างยา การพิษวิทยาของไต และการทดสอบการซึมผ่าน ด้วยลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเยื่อบุผิวที่ชัดเจนและการผลิตพลาสมิโนเจนแอคติเวเตอร์และไซโตเคราติน เซลล์ LLC-PK1 จึงเป็นแบบจำลองที่เหมาะสมสำหรับเนื้อเยื่อเยื่อบุผิว

Tissue
ไต
Applications
การเผาผลาญยา, การทดสอบการซึมผ่าน, ความเป็นพิษ, และการศึกษาการโต้ตอบ
Synonyms
  • LLC-PK(1)
  • LLC-PK-1
  • LLC PK-1
  • LLc-PK1
  • LLC PK1
  • LLCPK1
  • Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1

02Classification

Organism
Pig
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
LLC-PK1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 607264)
NCBI TaxID
9823
Cellosaurus
CVCL_0391

05Expression and susceptibility

Viruses
มีลำดับพันธุกรรมและทรานสคริปต์ของไวรัสชนิดก่อมะเร็งในสุกร (PCOV) ชนิด C ไม่สามารถตัดความเป็นไปได้ของการแสดงออกของไวรัสได้
Products
พลาสมินเจนแอคติเวเตอร์

06Handling and culture

Culture medium
มีเดียม 199, w: 2.7 mM สเตเบิลกลูตามีน, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820101a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 3%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
รวบรวมเซลล์ที่ลอยในหลอดขนาด 15 มิลลิลิตร และล้างเซลล์ที่ติดผนังอย่างเบามือด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม (ใช้ 3-5 มิลลิลิตรสำหรับขวด T25 และ 5-10 มิลลิลิตรสำหรับขวด T75)นำ Accutase (1-2 มล. สำหรับขวด T25, 2.5 มล. สำหรับขวด T75) ใส่ให้ทั่วชั้นเซลล์อย่างทั่วถึง ปล่อยให้เซลล์พักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที หลังจากนั้นรวมและปั่นเหวี่ยงทั้งเซลล์แขวนลอยและเซลล์ที่เกาะติด หลังจากปั่นเหวี่ยงแล้ว ให้นำเซลล์ที่ตกตะกอนมาแขวนลอยอย่างระมัดระวังและถ่ายเซลล์แขวนลอยไปยังขวดใหม่ที่มีอาหารเลี้ยงเซลล์สด
Seeding density
1 ถึง 3 x 10^6 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
ทุก 3 วัน
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
แฮมป์เชียร์
Donor age
3-4 สัปดาห์