LLC-PK1

LLC-PK1 šūnas ir labi pazīstama un plaši izmantota šūnu līnija biomedicīnas pētījumos. Šīs šūnas tika iegūtas no veselas cūkas vīrieša nieres ar tipisku epitēlija morfoloģiju. LLC-PK1 līnija ir polarizēta un satur ciešus savienojumus, padarot to par ideālu epitēlija audu modeli.

Viena no būtiskākajām LLC-PK1 šūnu īpašībām ir to spēja ražot plazminogēna aktivatoru - vielu, kas stimulē fibrinolīzi. Šī īpašība ir padarījusi LLC-PK1 šūnas īpaši vērtīgas trombozes pētījumos.

Pēdējos gados plazminogēna aktivators ir iekļauts medikamentos, ko izmanto trombozes terapijā, jo tas atvieglo nelielu asins recekļu šķīdināšanu. Papildus plazminogēna aktivatoru ražošanai LLC-PK1 šūnas ražo lielu daudzumu citokeratīna. Šī īpašība ir padarījusi tās populāras dažādos farmakoloģiskos un metaboliskos pētījumos.

LLC-PK1 līnija ir izmantota zāļu metabolisma, transporta, toksicitātes un mijiedarbības pētījumos. LLC-PK1 šūnas bieži izmanto arī caurlaidības testos. Uracila transporta mehānisms atšķiras atkarībā no šūnu līnijām - Caco-2 šūnās ir no Na+ neatkarīga sistēma uz bazolaterālās membrānas, bet LLC-PK1 šūnās ir gan no Na+ atkarīga, gan no Na+ neatkarīga sistēma uz apikālās membrānas.

Salīdzinot ar citām šūnu līnijām, LLC-PK1 šūnām ir daudzas proksimālo kanāliņu šūnu īpašības in vivo, tostarp apikālās membrānas mikrovilas, augsta apikālās membrānas enzīmu aktivitāte un paratireoīdā hormona receptoru un nātrija atkarīgo glikozes transportieru ekspresija. Tas padara LLC-PK1 šūnas par vērtīgu līdzekli nieru toksikoloģijas pētījumos. Cita šūnu līnija, ko parasti izmanto nieru toksikoloģijas pētījumos, ir MDCK šūnu līnija. Tāpat kā LLC-PK1 šūnas, arī MDCK šūnas ir epitēlija šūnas, bet tām ir raksturīgākas distālo kanāliņu šūnu īpašības.

Tās ekspresē vazopresīna, oksitocīna un prostaglandīnu receptorus, kas stimulēti aktivē adenilātciklāzi. LLC-PK1 un MDCK šūnu līnijas strauji vairojas, un tās var viegli pasažēt daudzās paaudzēs monoslāņa kultūrās. LLC-PK1 šūnas spēj arī veidot "kupolus", ar šķidrumu piepildītus pūslīšus, kas veidojas ūdens un izšķīdušo vielu transporta, ciešo savienojumu un šūnu adhēzijas ar substrātu rezultātā.

Tātad LLC-PK1 šūnu līnija ir daudzpusīgs un vērtīgs instruments biomedicīniskajiem pētījumiem. Tā ir plaši izmantota dažādos zāļu metabolisma, zāļu transporta, zāļu toksicitātes, zāļu un zāļu mijiedarbības, nieru toksikoloģijas un caurlaidības testos. LLC-PK1 šūnas ar labi izveidotu epitēlija morfoloģiju un plazminogēna aktivatora un citokeratīna produkciju ir ideāls epitēlija audu modelis.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu