LS180

La lignée cellulaire LS180 est une lignée d’adénocarcinome du côlon humain issue de la tumeur primaire d’une patiente adulte atteinte d’un adénocarcinome du côlon modérément bien différencié ayant métastasé dans le tissu adipeux péricolique. Ces cellules présentent une morphologie épithéliale, avec une forme ovale à polygonale et un diamètre variant de 20 à 40 μm. Elles affichent des caractéristiques ultrastructurales typiques des cellules normales de la muqueuse colique, notamment des microvillosités abondantes — particulièrement marquées dans les cellules sécrétrices — et la présence de vacuoles de mucine intracytoplasmiques. Ces cellules présentent les caractéristiques distinctives d’une néoplasie, notamment des niveaux élevés de production d’antigène carcino-embryonnaire (ACE) et la capacité de former des tumeurs tant dans les poches buccales de hamsters que chez des souris immunodéficientes, ce qui indique leur potentiel tumorigène in vivo.

Les cellules LS180 se distinguaient par leurs taux exceptionnellement élevés de production de CEA, libérant environ 900 fois plus de CEA par cellule dans le milieu de culture et contenant 30 fois plus de CEA associé aux cellules que d’autres lignées de cancer du côlon telles que HT-29. Cela fait de la lignée LS180 un modèle précieux pour l’étude des propriétés biochimiques, immunologiques et fonctionnelles de l’épithélium colique néoplasique, en particulier en ce qui concerne les marqueurs tumoraux associés au CEA. Le caryotype de ces cellules a été établi et il a été confirmé qu’elles présentaient un caryotype anormal compatible avec une transformation néoplasique. Leur identité épithéliale et leurs caractéristiques associées à la tumeur les rendent adaptées à une utilisation dans les essais immunologiques, le criblage de médicaments et les études sur la biologie du cancer colorectal et la réponse thérapeutique.

De plus, la lignée LS180 fait partie de la Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), où elle a fait l’objet d’une caractérisation approfondie grâce à un profilage multi-omique comprenant la protéomique, la transcriptomique et les données sur les mutations. La lignée LS180 est classée comme une lignée cellulaire présentant une instabilité des microsatellites (MSI), un phénotype associé à un génome hypermuté et connu pour affecter l’organisation du protéome ainsi que les vulnérabilités thérapeutiques. L’analyse protéomique de la LS180 a révélé que les lignées cellulaires MSI, y compris la LS180, présentent une dérégulation significative des complexes protéiques impliqués dans la surveillance des mutations et le contrôle de la traduction, ce qui apporte un éclairage sur les mécanismes de sensibilité et de résistance aux médicaments. Les données protéomiques confirment en outre que la coordination à grande échelle de l’expression protéique au niveau des voies métaboliques dans la lignée LS180 est découplée de l’expression de l’ARN, soulignant l’importance des études directes au niveau protéique.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.