Skip to content
LS180
Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
LS-180, LS 180, Laboratory of Surgery 180

Documents

LS180

Cell line · Product number 305823

LS180 is a human colon adenocarcinoma cell line established from the primary tumor of an adult female patient with moderately well-differentiated colon ad...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

LS180 הוא קו תאים של אדנוקרצינומה במעי הגס האנושי, שהוקם מהגידול הראשוני של מטופלת בוגרת עם אדנוקרצינומה במעי הגס בדרגת התמיינות בינונית, ששלחה גרורות לרקמת השומן סביב המעי. התאים הם בעלי מורפולוגיה אפיתלית, בצורת אליפסה עד מצולע וקוטר הנע בין 20 ל-40 מיקרומטר. הם מציגים מאפיינים אולטרא-מבניים האופייניים לתאי רירית המעי הגס הנורמליים, כולל מיקרו-וילי רבים - הבולטים במיוחד בתאי הפרשה - ונוכחות של וקוולות מוקין תוך-ציטופלזמטיות. תאים אלה מציגים מאפיינים בולטים של נאופלזיה, כולל רמות גבוהות של ייצור אנטיגן קרצינו-עוברי (CEA) ויכולת ליצור גידולים הן בכיסי הלחיים של אוגרים והן בעכברים חסרי חיסון, מה שמעיד על הפוטנציאל הגידולי שלהם in vivo.

תאי LS180 בלטו ברמות גבוהות במיוחד של ייצור CEA, שחררו כ-900 פעמים יותר CEA לכל תא לתוך מצע התרבית ונשאו 30 פעמים יותר CEA הקשור לתאים מאשר קווי סרטן המעי הגס אחרים, כגון HT-29. זה הופך את LS180 למודל חשוב לחקר התכונות הביוכימיות, האימונולוגיות והתפקודיות של אפיתל המעי הגס הנאו-פלסטי, במיוחד ביחס לסמני גידול הקשורים ל-CEA. התאים עברו קריוטיפ ונמצא כי הם בעלי תוספות כרומוזומליות חריגות התואמות לשינוי נאופלסטי. זהותם האפיתלית ותכונותיהם הקשורות לגידול הופכות אותם למתאימים לשימוש בבדיקות אימונולוגיות, סינון תרופות ומחקרים על ביולוגיה של סרטן המעי הגס ותגובה טיפולית.

בנוסף, LS180 הוא חלק מאנציקלופדיית קווי תאים סרטניים (CCLE), שם הוא אופיין לעומק באמצעות פרופיל רב-אומטי הכולל פרוטאומיקה, טרנסקריפטומיקה ונתוני מוטציות. LS180 מסווג כקו תאים לא יציב במיקרו-לווין (MSI), פנוטיפ הקשור לגנום היפר-מוטציה וידוע כמשפיע על ארגון הפרוטאום ועל פגיעות טיפולית. הניתוח הפרוטאומי של LS180 גילה כי קווי תאים MSI, כולל LS180, מפגינים חוסר ויסות משמעותי של קומפלקסים חלבוניים המעורבים בפיקוח על מוטציות ובקרה תרגומית, ומספקים תובנות על מנגנוני רגישות ועמידות לתרופות. נתוני הפרוטאומיקה תומכים עוד יותר בכך שתאום בקנה מידה גדול ברמת המסלול בביטוי חלבוני ב-LS180 מנותק מביטוי RNA, מה שמדגיש את החשיבות של מחקרים ישירים ברמת החלבון.

Tissue
קולון
Disease
אדנוקרצינומה
Synonyms
  • LS-180
  • LS 180
  • Laboratory of Surgery 180

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Cell type
תא אפיתל של המעי הגס
Tumourigenic
כן; כן, בעכברים עירומים
Karyotype
מספר מודאלי = 45; טווח = 42 עד 47.
Doubling time
72 שעות

04Identifiers

Citation
LS180 (מספר קטלוגי Cytion 305823)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0397

05Expression and susceptibility

Antigen expression
אנטיגן 3 של סרטן המעי הגס המוגדר סרולוגית; Homo sapiens, מבוטא HLA A2, B13, B50; סוג דם O
Isoenzymes
ADA, 1 ES-D, 1 G6PD, B PEP-D, 1 PGD, A PGM1, 1 PGM3, 2
Mutational profile
מוטציה: ACVR2A, פשוט, p.Lys437Argfs*5 (c.1310delA), הומוזיגוטי, מוטציה, CTNNB1, פשוט, p.Ser45Phe (c.134C>T), הומוזיגוטי, KRAS, פשוט, p.Gly12Asp (c.35G>A), הטרוזיגוטי. מוטציה, PIK3CA, פשוטה, p.His1047Arg (c.3140A>G), לא מוגדרת מוטציה, TGFBR2, פשוטה, p.Lys128Serfs*35 (c.383delA), הומוזיגוטי; מוטציה, TP53

06Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
58 שנים
Ethnicity
קווקזי