LS180

LS180 je celična linija človeškega adenokarcinoma debelega črevesa, pridobljena iz primarnega tumorja odrasle pacientke z zmerno dobro diferenciranim adenokarcinomom debelega črevesa, ki je metastaziral v perikolno maščobno tkivo. Celice so epitelijske, ovalne do poligonalne oblike in premera od 20 do 40 μm. Imajo ultrastrukturne značilnosti, značilne za normalne celice sluznice debelega črevesa, vključno z obilico mikrovilov - še posebej izrazitih v sekretornih celicah - in prisotnostjo intracitoplazemskih mucinskih vakuolic. Te celice imajo značilne lastnosti neoplazije, vključno z visoko stopnjo tvorbe karcinoembrionalnega antigena (CEA) in zmožnostjo tvorbe tumorjev v ličnih vrečah hrčkov in imunodeficientnih miših, kar kaže na njihov tumorigen potencial in vivo.

Celice LS180 so se odlikovale po izjemno visoki stopnji proizvodnje CEA, saj so v gojišče sproščale približno 900-krat več CEA na celico in nosile 30-krat več CEA, povezanega s celico, kot druge linije raka debelega črevesa, kot je HT-29. Zaradi tega je LS180 dragocen model za preučevanje biokemičnih, imunoloških in funkcionalnih lastnosti neoplastičnega epitelija debelega črevesa, zlasti v povezavi s tumorskimi označevalci, povezanimi s CEA. Celice so bile kariotipizirane in potrjeno je bilo, da imajo nenormalne kromosomske dopolnitve, ki so skladne z neoplastično transformacijo. Zaradi njihove epitelijske identitete in s tumorjem povezanih lastnosti so primerne za uporabo v imunoloških testih, presejanju zdravil ter študijah biologije in terapevtskega odziva kolorektalnega raka.

Poleg tega je LS180 del enciklopedije Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), kjer je bil temeljito okarakteriziran z večomskim profiliranjem, vključno s proteomiko, transkriptomiko in podatki o mutacijah. LS180 je uvrščena med mikrosatelitno nestabilne (MSI) celične linije, fenotip, povezan s hipermutiranim genomom, za katerega je znano, da vpliva na organizacijo proteoma in terapevtsko ranljivost. Proteomska analiza LS180 je pokazala, da celične linije MSI, vključno z LS180, kažejo znatno disregulacijo beljakovinskih kompleksov, ki sodelujejo pri nadzoru mutacij in nadzoru prevajanja, kar ponuja vpogled v mehanizme občutljivosti in odpornosti na zdravila. Proteomski podatki dodatno potrjujejo, da je obsežno usklajevanje izražanja beljakovin na ravni poti v LS180 ločeno od izražanja RNK, kar poudarja pomen neposrednih preiskav na ravni beljakovin.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo