LS180

LS180 è una linea cellulare umana di adenocarcinoma del colon, ottenuta dal tumore primario di un paziente adulto di sesso femminile affetto da adenocarcinoma del colon moderatamente ben differenziato che aveva metastatizzato nel tessuto adiposo pericoloso. Le cellule hanno una morfologia epiteliale, con una forma da ovale a poligonale e un diametro compreso tra 20 e 40 μm. Presentano caratteristiche ultrastrutturali tipiche delle normali cellule della mucosa del colon, tra cui abbondanti microvilli - particolarmente evidenti nelle cellule secretorie - e la presenza di vacuoli mucinici intracitoplasmatici. Queste cellule mostrano caratteristiche tipiche della neoplasia, tra cui alti livelli di produzione di antigene carcinoembrionale (CEA) e la capacità di formare tumori sia nelle guance dei criceti che nei topi immunodeficienti, indicando il loro potenziale tumorigenico in vivo.

Le cellule LS180 si sono distinte per i loro livelli eccezionalmente elevati di produzione di CEA, rilasciando circa 900 volte più CEA per cellula nel mezzo di coltura e trasportando 30 volte più CEA associato alla cellula rispetto ad altre linee di cancro del colon come HT-29. Questo rende le LS180 un modello prezioso per la formazione di tumori, sia nel caso di guance di criceto che di topi immunodeficienti. Ciò rende LS180 un modello prezioso per lo studio delle proprietà biochimiche, immunologiche e funzionali dell'epitelio neoplastico del colon, in particolare in relazione ai marcatori tumorali associati al CEA. Le cellule sono state sottoposte a cariotipo e hanno confermato di avere complementi cromosomici anomali, coerenti con la trasformazione neoplastica. La loro identità epiteliale e le caratteristiche associate al tumore le rendono adatte all'uso in saggi immunologici, allo screening di farmaci e a studi sulla biologia del cancro del colon-retto e sulla risposta terapeutica.

Inoltre, LS180 fa parte della Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), dove è stata caratterizzata in modo approfondito attraverso una profilazione multi-omica che comprende proteomica, trascrittomica e dati sulle mutazioni. LS180 è classificata come linea cellulare microsatellitare instabile (MSI), un fenotipo associato a un genoma ipermutato e noto per influenzare l'organizzazione del proteoma e le vulnerabilità terapeutiche. L'analisi proteomica di LS180 ha rivelato che le linee cellulari MSI, tra cui LS180, presentano una significativa disregolazione dei complessi proteici coinvolti nella sorveglianza delle mutazioni e nel controllo traslazionale, offrendo spunti di riflessione sui meccanismi di sensibilità e resistenza ai farmaci. I dati proteomici supportano inoltre che il coordinamento su larga scala a livello di pathway nell'espressione delle proteine in LS180 è disaccoppiato dall'espressione dell'RNA, sottolineando l'importanza di indagini dirette a livello proteico.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia