LS180

LS180 je ľudská bunková línia adenokarcinómu hrubého čreva vytvorená z primárneho nádoru dospelej pacientky so stredne dobre diferencovaným adenokarcinómom hrubého čreva, ktorý metastázoval do perikolického tukového tkaniva. Morfológia buniek je epitelová, majú oválny až polygonálny tvar a priemer od 20 do 40 μm. Vykazujú ultraštrukturálne charakteristiky typické pre normálne bunky sliznice hrubého čreva vrátane hojných mikroklkov - obzvlášť výrazných v sekrečných bunkách - a prítomnosti intracytoplazmatických mucínových vakuol. Tieto bunky vykazujú charakteristické znaky neoplázie vrátane vysokej produkcie karcinoembryonálneho antigénu (CEA) a schopnosti tvoriť nádory v lícnych vakoch škrečkov a imunodeficientných myší, čo poukazuje na ich nádorový potenciál in vivo.

Bunky LS180 sa vyznačovali mimoriadne vysokou produkciou CEA, pričom uvoľňovali približne 900-krát viac CEA na bunku do kultivačného média a niesli 30-krát viac CEA asociovaného s bunkou ako iné línie rakoviny hrubého čreva, napríklad HT-29. To robí z LS180 cenný model na štúdium biochemických, imunologických a funkčných vlastností neoplastického epitelu hrubého čreva, najmä vo vzťahu k nádorovým markerom spojeným s CEA. Bunky boli karyotypizované a potvrdilo sa, že majú abnormálne chromozómové komplexy zodpovedajúce neoplastickej transformácii. Ich epitelová identita a nádorové vlastnosti ich predurčujú na použitie v imunologických testoch, pri skríningu liekov a v štúdiách biológie kolorektálneho karcinómu a terapeutickej odpovede.

Okrem toho je LS180 súčasťou encyklopédie rakovinových bunkových línií (Cancer Cell Line Encyclopedia - CCLE), kde bola dôkladne charakterizovaná prostredníctvom multiomického profilovania vrátane proteomiky, transkriptomiky a údajov o mutáciách. LS180 je klasifikovaná ako mikrosatelitne nestabilná (MSI) bunková línia, čo je fenotyp spojený s hypermutovaným genómom a známy tým, že ovplyvňuje organizáciu proteómu a terapeutickú zraniteľnosť. Proteomická analýza LS180 odhalila, že bunkové línie MSI vrátane LS180 vykazujú výraznú dysreguláciu proteínových komplexov zapojených do dohľadu nad mutáciami a kontroly translácie, čo ponúka pohľad na mechanizmy citlivosti a rezistencie na lieky. Proteomické údaje ďalej potvrdzujú, že rozsiahla koordinácia na úrovni dráh v expresii proteínov v LS180 je oddelená od expresie RNA, čo zdôrazňuje význam priameho skúmania na úrovni proteínov.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke