LS180

LS180, perikolik yağ dokusuna metastaz yapmış orta derecede iyi farklılaşmış kolon adenokarsinomu olan yetişkin bir kadın hastanın primer tümöründen oluşturulan bir insan kolon adenokarsinom hücre hattıdır. Hücreler morfolojik olarak epitelyaldir, ovalden çokgene kadar değişen bir şekle ve 20 ila 40 μm arasında değişen çaplara sahiptir. Normal kolonik mukozal hücrelerin tipik ultrastrüktürel özelliklerini sergilerler; bol miktarda mikrovillus -özellikle salgı hücrelerinde belirgindir- ve intrasitoplazmik müsin vakuollerinin varlığı gibi. Bu hücreler, yüksek düzeyde karsinoembriyonik antijen (CEA) üretimi ve hem hamster yanak keselerinde hem de immün yetmezliği olan farelerde tümör oluşturma yeteneği gibi neoplazinin ayırt edici özelliklerini sergileyerek in vivo tümörijenik potansiyellerini gösterir.

LS180 hücreleri, kültür ortamına hücre başına yaklaşık 900 kat daha fazla CEA salgılayarak ve HT-29 gibi diğer kolon kanseri hatlarından 30 kat daha fazla hücre ilişkili CEA taşıyarak olağanüstü yüksek CEA üretim seviyeleriyle dikkat çekmiştir. Bu durum LS180'i neoplastik kolon epitelinin biyokimyasal, immünolojik ve işlevsel özelliklerini, özellikle de CEA ile ilişkili tümör belirteçleriyle ilişkili olarak incelemek için değerli bir model haline getirmektedir. Hücreler karyotiplendirilmiş ve neoplastik dönüşümle uyumlu anormal kromozomal tamamlayıcılara sahip oldukları doğrulanmıştır. Epitelyal kimlikleri ve tümörle ilişkili özellikleri onları immünolojik testlerde, ilaç taramasında ve kolorektal kanser biyolojisi ve terapötik yanıt üzerine yapılan çalışmalarda kullanıma uygun hale getirmektedir.

Ayrıca LS180, proteomik, transkriptomik ve mutasyon verileri de dahil olmak üzere multi-omik profilleme yoluyla derinlemesine karakterize edildiği Kanser Hücre Hattı Ansiklopedisi'nin (CCLE) bir parçasıdır. LS180, hipermutasyonlu bir genomla ilişkili bir fenotip olan ve proteom organizasyonunu ve terapötik kırılganlıkları etkilediği bilinen bir mikrosatellit instabil (MSI) hücre hattı olarak sınıflandırılmıştır. LS180'in proteomik analizi, LS180 de dahil olmak üzere MSI hücre hatlarının, mutasyon gözetimi ve translasyon kontrolünde yer alan protein komplekslerinin önemli ölçüde düzensizliğini sergilediğini ve ilaç duyarlılığı ve direnci mekanizmalarına ilişkin içgörüler sunduğunu ortaya koymuştur. Proteomik veriler, LS180'deki protein ifadesinde büyük ölçekli yol düzeyinde koordinasyonun RNA ifadesinden ayrıldığını destekleyerek doğrudan protein düzeyinde araştırmaların öneminin altını çizmektedir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın