LS180

LS180 ir cilvēka resnās zarnas adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no primārā audzēja pieaugušai pacientei ar vidēji labi diferencētu resnās zarnas adenokarcinomu, kas bija metastāzējusi perikoliskajos taukaudos. Šūnu morfoloģija ir epitēlija, tās ir ovālas līdz daudzstūra formas un diametrs ir no 20 līdz 40 μm. Tām piemīt normālām resnās zarnas gļotādas šūnām raksturīgas ultrastrukturālas īpašības, tostarp bagātīgi mikroviļi - īpaši izteikti sekrēcijas šūnās - un intracitoplazmatisku mucīna vakuolu klātbūtne. Šīm šūnām ir raksturīgas neoplāzijas pazīmes, tostarp augsts karcīnoembrionālā antigēna (CEA) līmenis un spēja veidot audzējus gan kāmju vaigu maisiņos, gan imūndeficītām pelēm, kas norāda uz to audzēja potenciālu in vivo.

LS180 šūnas izcēlās ar ārkārtīgi augstu CEA produkcijas līmeni, izdalot kultūras vidē aptuveni 900 reižu vairāk CEA uz vienu šūnu un nesot 30 reižu vairāk ar šūnām saistītā CEA nekā citas resnās zarnas vēža līnijas, piemēram, HT-29. Tas padara LS180 par vērtīgu modeli, lai pētītu jaunveidojušos resnās zarnas epitēlija bioķīmiskās, imunoloģiskās un funkcionālās īpašības, jo īpaši saistībā ar CEA saistītajiem audzēju marķieriem. Šūnām ir veikts kariotipējums, un apstiprināts, ka tām ir patoloģiski hromosomu papildinājumi, kas atbilst neoplastiskai transformācijai. To epitēlija identitāte un ar audzēju saistītās pazīmes padara tās piemērotas izmantošanai imunoloģiskajos testos, zāļu skrīningā un kolorektālā vēža bioloģijas un terapeitiskās atbildes reakcijas pētījumos.

Turklāt LS180 ir daļa no vēža šūnu līniju enciklopēdijas (Cancer Cell Line Encyclopedia, CCLE), kur tā ir padziļināti raksturota, izmantojot daudzkomuniku profilēšanu, tostarp proteomiku, transkriptomiku un mutāciju datus. LS180 ir klasificēta kā mikrosatelītu nestabilā (MSI) šūnu līnija, kas ir fenotips, kurš saistīts ar hipermutētu genomu un par kuru ir zināms, ka tas ietekmē proteomu organizāciju un terapeitisko ievainojamību. LS180 proteomiskā analīze atklāja, ka MSI šūnu līnijām, tostarp LS180, ir ievērojami traucēta mutaciju uzraudzībā un translācijas kontrolē iesaistīto olbaltumvielu kompleksu regulācija, kas sniedz ieskatu zāļu jutības un rezistences mehānismos. Proteomikas dati vēl vairāk apstiprina, ka plaša mēroga ceļu līmeņa koordinācija proteīnu ekspresijā LS180 ir atdalīta no RNS ekspresijas, uzsverot tiešas proteīnu līmeņa izpētes nozīmi.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu