الانتقال إلى المحتوى
LS180
الأنسجة
القولون
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
LS-180, LS 180, Laboratory of Surgery 180

المستندات

LS180

Cell line · رقم المنتج 305823

LS180 هو خط خلوي لسرطان غدي في القولون البشري، تم إنشاؤه من الورم الأصلي لمريضة بالغة مصابة بسرطان غدي في القولون متوسط التمايز...

€550.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن

التخصيص / التوصيات

متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

LS180 هو خط خلايا سرطان القولون الغدي البشري الذي تم إنشاؤه من الورم الأولي لمريضة بالغة مصابة بسرطان القولون الغدي المتمايز بشكل معتدل والذي انتشر إلى الأنسجة الدهنية حول القولون. تتشكل الخلايا بشكل طلائي بيضاوي إلى متعدد الأضلاع ويتراوح قطرها بين 20 إلى 40 ميكرومتر. تُظهر خصائص فوق بنيوية فوق هيكلية نموذجية للخلايا المخاطية القولونية الطبيعية، بما في ذلك وجود فجوات مخاطية داخل الأنتروبلازمية - تبرز بشكل خاص في الخلايا الإفرازية - ووجود فجوات مخاطية داخل الأنتروبلازم. تُظهر هذه الخلايا السمات المميزة للأورام، بما في ذلك مستويات عالية من إنتاج مستضد كارسينو الغشاء المخاطي (CEA) والقدرة على تكوين أورام في كل من أكياس خد الهامستر والفئران التي تعاني من نقص المناعة، مما يشير إلى قدرتها على تكوين الأورام في الجسم الحي.

تميزت خلايا LS180 بمستوياتها العالية بشكل استثنائي من إنتاج CEA، حيث تطلق ما يقرب من 900 مرة أكثر من CEA لكل خلية في وسط الاستزراع وتحمل CEA المرتبط بالخلية أكثر من 30 مرة أكثر من سلالات سرطان القولون الأخرى مثل HT-29. وهذا يجعل من LS180 نموذجًا قيّمًا لدراسة الخصائص الكيميائية الحيوية والمناعية والوظيفية لظهارة القولون الورمية، خاصةً فيما يتعلق بعلامات الورم المرتبطة بـ CEA. تم تحديد النمط الكروموسومي للخلايا وتأكد أن الخلايا تحتوي على مكملات كروموسومية غير طبيعية تتفق مع التحول الورمي. إن هويتها الظهارية وسماتها المرتبطة بالورم تجعلها مناسبة للاستخدام في الفحوصات المناعية وفحص الأدوية والدراسات حول بيولوجيا سرطان القولون والمستقيم والاستجابة العلاجية.

بالإضافة إلى ذلك، تُعد LS180 جزءًا من موسوعة خطوط الخلايا السرطانية (CCLE)، حيث تم توصيفها بعمق من خلال التنميط متعدد الجزيئات بما في ذلك البروتيوميات والنسخ وبيانات الطفرات. تم تصنيف LS180 على أنه خط خلوي غير مستقر للأقمار الصناعية الدقيقة (MSI)، وهو نمط ظاهري مرتبط بجينوم مفرط الطفرات ومعروف بتأثيره على تنظيم البروتينات ونقاط الضعف العلاجية. كشف التحليل البروتيني ل LS180 أن خطوط خلايا MSI، بما في ذلك LS180، تُظهر خللًا كبيرًا في تنظيم مجمعات البروتين المشاركة في مراقبة الطفرات والتحكم في الترجمة، مما يوفر نظرة ثاقبة لآليات الحساسية للأدوية ومقاومتها. تدعم البيانات البروتينية كذلك أن التنسيق واسع النطاق على مستوى المسار في التعبير البروتيني في LS180 منفصل عن تعبير الحمض النووي الريبي (RNA)، مما يؤكد أهمية التحقيقات المباشرة على مستوى البروتين.

الأنسجة
القولون
المرض
السرطان الغدي
المرادفات
  • LS-180
  • LS 180
  • Laboratory of Surgery 180

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

نوع الخلية
الخلية الظهارية للقولون
مُسبِّب للأورام
نعم؛ نعم، في الفئران العارية
النمط الكروموسومي
الرقم القياسي = 45؛ النطاق = 42 إلى 47.
زمن المضاعفة
72 ساعة

04المعرّفات

المرجع
LS180 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305823)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0397

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
مستضد سرطان القولون المحدد مَصْلياً 3؛ الإنسان العاقل، ويعبر عنه HLA A2 و B13 و B50؛ فصيلة الدم O
الإيزوزيمات
1 أ ع م ع، 1 مد-1، 1 مد-1، 1 خ ع-6، 1 خ ع (ر أ)، 1 خ ع (ر أ)، 1 خ ع (ر أ)، 1 خ ع (ر أ)، 2
الأنماط الطفريّة
الطفرة: ACVR2A، بسيط، p.Lys437Argfs*5 (c.1310delA)، متماثل الزيجات، طفرة، CTNNB1، بسيط، p.Ser45Phe (c.134C>T)، متماثل الزيجات، KRAS، بسيط، p.Gly12Asp (c.35G>A)، متغاير الزيجات، طفرة. طفرة، PIK3CA، بسيط، p.His1047Arg (c.3140A>G)، غير محدد طفرة TGFBR2، بسيط، p.Lys128Serfs*35 (c.383delA)، متماثل الزيجوت؛ طفرة، TP53

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
EMEM (MEM Eagle)، ث: 2 ميلي مولار-جلوتامين، ث: 2.2 جم/لتر NaHCO3، ث: EBSS (رقم المادة 820100a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
58 سنة
الأصل العرقي
قوقازي