LS180

A LS180 é uma linhagem celular de adenocarcinoma de cólon humano estabelecida a partir do tumor primário de uma paciente adulta com adenocarcinoma de cólon moderadamente bem diferenciado que havia metastatizado para o tecido adiposo pericolônico. As células apresentam morfologia epitelial, com formato oval a poligonal e diâmetros que variam de 20 a 40 μm. Elas exibem características ultraestruturais típicas das células normais da mucosa colônica, incluindo microvilosidades abundantes — particularmente proeminentes nas células secretoras — e a presença de vacúolos de mucina intracitoplasmáticos. Essas células apresentam características marcantes de neoplasia, incluindo altos níveis de produção do antígeno carcinoembrionário (CEA) e a capacidade de formar tumores tanto nas bolsas bucais de hamsters quanto em camundongos imunodeficientes, indicando seu potencial tumorigênico in vivo.

As células LS180 se destacaram por seus níveis excepcionalmente elevados de produção de CEA, liberando aproximadamente 900 vezes mais CEA por célula no meio de cultura e apresentando 30 vezes mais CEA associado às células do que outras linhagens de câncer de cólon, como a HT-29. Isso torna a LS180 um modelo valioso para o estudo das propriedades bioquímicas, imunológicas e funcionais do epitélio colônico neoplásico, particularmente em relação aos marcadores tumorais associados ao CEA. As células passaram por cariotipagem, e foi confirmado que apresentam complementos cromossômicos anormais, consistentes com a transformação neoplásica. Sua identidade epitelial e características associadas a tumores as tornam adequadas para uso em ensaios imunológicos, triagem de medicamentos e estudos sobre a biologia do câncer colorretal e a resposta terapêutica.

Além disso, a LS180 faz parte da Enciclopédia de Linhas Celulares de Câncer (CCLE), onde foi profundamente caracterizada por meio de perfis multi-ômicos, incluindo proteômica, transcriptômica e dados de mutações. A LS180 é classificada como uma linhagem celular com instabilidade de microssatélites (MSI), um fenótipo associado a um genoma hipermutado e conhecido por afetar a organização do proteoma e as vulnerabilidades terapêuticas. A análise proteômica da LS180 revelou que as linhas celulares MSI, incluindo a LS180, apresentam desregulação significativa dos complexos proteicos envolvidos na vigilância de mutações e no controle translacional, oferecendo insights sobre os mecanismos de sensibilidade e resistência aos medicamentos. Os dados proteômicos reforçam ainda mais a ideia de que a coordenação em grande escala da expressão proteica no nível das vias metabólicas na LS180 está dissociada da expressão de RNA, ressaltando a importância de investigações diretas no nível das proteínas.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.