LS180

Az LS180 egy humán vastagbél adenokarcinóma-sejtvonal, amelyet egy felnőtt nőbeteg, mérsékelten jól differenciált vastagbél adenokarcinómában szenvedő, a perikolikus zsírszövetbe áttétet adó primer tumorából hoztak létre. A sejtek epithelialis morfológiájúak, ovális vagy poligonális alakúak, átmérőjük 20 és 40 μm között mozog. A normál vastagbélnyálkahártya sejtjeire jellemző ultrastrukturális jellemzőket mutatnak, beleértve a bőséges mikrovillákat - különösen a szekréciós sejtekben kiemelkedő - és az intracitoplazmatikus mucin-vakuolumok jelenlétét. Ezek a sejtek a neoplázia jellemzőit mutatják, beleértve a magas szintű karcinoembrionális antigén (CEA) termelést és a tumorképződés képességét mind hörcsögpofa tasakokban, mind immunhiányos egerekben, ami in vivo tumorogén potenciáljukra utal.

Az LS180 sejtek kiemelkedően magas CEA-termelésükkel tűntek ki: sejtenként körülbelül 900-szor több CEA-t bocsátottak ki a táptalajba, és 30-szor több CEA-t hordoztak a sejtekhez kapcsolódóan, mint más vastagbélrákos sejtvonalak, mint például a HT-29. Ez teszi az LS180-at értékes modellé a daganatos vastagbélhám biokémiai, immunológiai és funkcionális tulajdonságainak tanulmányozására, különösen a CEA-asszociált tumormarkerek vonatkozásában. A sejteket kariotipizálták, és megerősítették, hogy rendellenes kromoszóma-komplementummal rendelkeznek, ami megfelel a neoplasztikus transzformációnak. Epithelialis identitásuk és tumorasszociált tulajdonságaik alkalmassá teszik őket immunológiai vizsgálatokban, gyógyszerszűrésben, valamint a vastagbélrák biológiájának és terápiás válaszának tanulmányozására.

Emellett az LS180 a Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE) része, ahol mélyrehatóan jellemezték a proteomikai, transzkriptomikai és mutációs adatokat is tartalmazó multi-omikai profilalkotás révén. Az LS180 mikroszatellita instabil (MSI) sejtvonalnak minősül, amely fenotípus hipermutált genommal jár együtt, és ismert, hogy befolyásolja a proteom szerveződését és a terápiás sebezhetőséget. Az LS180 proteomikai elemzése feltárta, hogy az MSI-sejtvonalak, köztük az LS180 is, a mutációfelügyeletben és a transzlációs kontrollban részt vevő fehérjekomplexek jelentős diszregulációját mutatják, ami betekintést nyújt a gyógyszerérzékenység és -rezisztencia mechanizmusaiba. A proteomikai adatok továbbá alátámasztják, hogy az LS180-ban a fehérjeexpresszió nagyfokú, útvonal-szintű koordinációja független az RNS-expressziótól, ami aláhúzza a közvetlen fehérjeszintű vizsgálatok fontosságát.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban