LS180

LS180 to ludzka linia komórkowa gruczolakoraka okrężnicy utworzona z guza pierwotnego dorosłej pacjentki z umiarkowanie dobrze zróżnicowanym gruczolakorakiem okrężnicy, który dał przerzuty do okołokomorowej tkanki tłuszczowej. Komórki mają morfologię nabłonkową, kształt od owalnego do wielokąta i średnicę od 20 do 40 μm. Wykazują cechy ultrastrukturalne typowe dla prawidłowych komórek błony śluzowej okrężnicy, w tym obfite mikrokosmki - szczególnie widoczne w komórkach wydzielniczych - oraz obecność wewnątrzcytoplazmatycznych wakuoli mucynowych. Komórki te wykazują charakterystyczne cechy neoplazji, w tym wysoki poziom produkcji antygenu rakowo-płodowego (CEA) i zdolność do tworzenia guzów zarówno w torebkach policzkowych chomików, jak i u myszy z niedoborem odporności, co wskazuje na ich potencjał nowotworowy in vivo.

Komórki LS180 wyróżniały się wyjątkowo wysokim poziomem produkcji CEA, uwalniając około 900 razy więcej CEA na komórkę do pożywki hodowlanej i przenosząc 30 razy więcej CEA związanego z komórką niż inne linie raka okrężnicy, takie jak HT-29. Sprawia to, że LS180 jest cennym modelem do badania biochemicznych, immunologicznych i funkcjonalnych właściwości nowotworowego nabłonka okrężnicy, szczególnie w odniesieniu do markerów nowotworowych związanych z CEA. Komórki zostały poddane kariotypowaniu i potwierdzono, że mają nieprawidłowe uzupełnienia chromosomalne zgodne z transformacją nowotworową. Ich tożsamość nabłonkowa i cechy związane z nowotworem sprawiają, że są one odpowiednie do stosowania w testach immunologicznych, badaniach przesiewowych leków oraz badaniach nad biologią raka jelita grubego i odpowiedzią terapeutyczną.

Dodatkowo, LS180 jest częścią Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), gdzie został dogłębnie scharakteryzowany poprzez profilowanie wieloomowe, w tym proteomikę, transkryptomikę i dane dotyczące mutacji. LS180 jest sklasyfikowana jako linia komórkowa niestabilna mikrosatelitarnie (MSI), fenotyp związany z hipermutowanym genomem i znany z wpływu na organizację proteomu i podatność terapeutyczną. Analiza proteomiczna LS180 wykazała, że linie komórkowe MSI, w tym LS180, wykazują znaczną dysregulację kompleksów białkowych zaangażowanych w nadzór mutacji i kontrolę translacji, oferując wgląd w mechanizmy wrażliwości i oporności na leki. Dane proteomiczne dodatkowo potwierdzają, że koordynacja na dużą skalę na poziomie szlaków w ekspresji białek w LS180 jest oddzielona od ekspresji RNA, podkreślając znaczenie bezpośrednich badań na poziomie białek.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym