LS180

LS180 er en human adenokarcinomcellelinje fra tyktarmen, der er etableret fra den primære tumor hos en voksen kvindelig patient med moderat veldifferentieret adenokarcinom fra tyktarmen, der havde metastaseret til det perikoliske fedtvæv. Cellerne er epiteliale i deres morfologi med en oval til polygonal form og en diameter på mellem 20 og 40 μm. De udviser ultrastrukturelle karakteristika, der er typiske for normale slimhindeceller i tyktarmen, herunder rigelige mikrovilli - især fremtrædende i sekretoriske celler - og tilstedeværelsen af intracytoplasmatiske mucinvakuoler. Disse celler udviser karakteristiske træk ved neoplasi, herunder høje niveauer af produktion af carcinoembryonalt antigen (CEA) og evnen til at danne tumorer i både hamster kindposer og immundefekte mus, hvilket indikerer deres tumorgeniske potentiale in vivo.

LS180-cellerne var bemærkelsesværdige for deres usædvanligt høje niveauer af CEA-produktion, idet de frigav ca. 900 gange mere CEA pr. celle i kulturmediet og havde 30 gange mere celleassocieret CEA end andre tyktarmskræftlinjer som HT-29. Det gør LS180 til en værdifuld model til undersøgelse af de biokemiske, immunologiske og funktionelle egenskaber af neoplastisk kolonepitel, især i forhold til CEA-associerede tumormarkører. Cellerne er blevet karyotyperet og bekræftet for at have unormale kromosomkomplementer i overensstemmelse med neoplastisk transformation. Deres epitelidentitet og tumorassocierede træk gør dem velegnede til brug i immunologiske analyser, screening af lægemidler og undersøgelser af biologi og terapeutisk respons på kolorektal cancer.

Derudover er LS180 en del af Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), hvor den er blevet dybt karakteriseret gennem multi-omics profilering, herunder proteomics, transcriptomics og mutationsdata. LS180 er klassificeret som en mikrosatellit-instabil (MSI) cellelinje, en fænotype, der er forbundet med et hypermuteret genom, og som er kendt for at påvirke proteomets organisering og terapeutiske sårbarheder. Den proteomiske analyse af LS180 afslørede, at MSI-cellelinjer, herunder LS180, udviser betydelig dysregulering af proteinkomplekser, der er involveret i mutationsovervågning og translationel kontrol, hvilket giver indsigt i mekanismer for lægemiddelfølsomhed og -resistens. De proteomiske data understøtter yderligere, at koordinering af proteinudtryk i stor skala på vejniveau i LS180 er afkoblet fra RNA-ekspression, hvilket understreger vigtigheden af direkte undersøgelser på proteinniveau.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring