LS180

A LS180 é uma linha celular de adenocarcinoma do cólon humano estabelecida a partir do tumor primário de uma doente adulta com adenocarcinoma do cólon moderadamente bem diferenciado que tinha metastizado para o tecido adiposo pericólico. As células têm uma morfologia epitelial, com uma forma oval a poligonal e diâmetros que variam entre 20 e 40 μm. Apresentam caraterísticas ultra-estruturais típicas das células normais da mucosa do cólon, incluindo microvilosidades abundantes - particularmente proeminentes nas células secretoras - e a presença de vacúolos de mucina intracitoplasmáticos. Estas células apresentam caraterísticas marcantes de neoplasia, incluindo níveis elevados de produção de antigénio carcinoembrionário (CEA) e a capacidade de formar tumores tanto em bolsas de bochecha de hamster como em ratinhos imunodeficientes, o que indica o seu potencial tumorigénico in vivo.

As células LS180 destacaram-se pelos seus níveis excecionalmente elevados de produção de CEA, libertando aproximadamente 900 vezes mais CEA por célula para o meio de cultura e transportando 30 vezes mais CEA associado às células do que outras linhas de cancro do cólon, como a HT-29. Isto faz da LS180 um modelo valioso para o estudo das propriedades bioquímicas, imunológicas e funcionais do epitélio neoplásico do cólon, particularmente em relação aos marcadores tumorais associados ao CEA. As células foram cariotipadas e confirmadas como tendo complementos cromossómicos anormais consistentes com a transformação neoplásica. A sua identidade epitelial e as caraterísticas associadas ao tumor tornam-nas adequadas para utilização em ensaios imunológicos, rastreio de medicamentos e estudos sobre a biologia do cancro colorrectal e a resposta terapêutica.

Além disso, a LS180 faz parte da Cancer Cell Line Encyclopedia (CCLE), onde foi profundamente caracterizada através de perfis multi-ómicos, incluindo dados proteómicos, transcriptómicos e de mutação. A LS180 está classificada como uma linha celular instável por microssatélites (MSI), um fenótipo associado a um genoma hipermutado e conhecido por afetar a organização do proteoma e as vulnerabilidades terapêuticas. A análise proteómica da LS180 revelou que as linhas celulares MSI, incluindo a LS180, apresentam uma desregulação significativa dos complexos proteicos envolvidos na vigilância das mutações e no controlo da tradução, o que permite compreender os mecanismos de sensibilidade e resistência aos medicamentos. Os dados proteómicos confirmam ainda que a coordenação a nível das vias de expressão proteica em larga escala na LS180 está dissociada da expressão de ARN, sublinhando a importância de investigações diretas a nível proteico.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia