LS180

LS180 on inimese käärsoole adenokartsinoomi rakuliin, mis on loodud täiskasvanud naissoost patsiendi esmase kasvaja põhjal, kellel oli mõõdukalt diferentseerunud käärsoole adenokartsinoom, mis oli metastaseerunud perikooli rasvkoesse. Rakud on morfoloogiliselt epiteliaalsed, ovaalse kuni hulknurkse kujuga ja läbimõõduga 20-40 μm. Neil on normaalsetele jämesoole limaskesta rakkudele iseloomulikud ultrastruktuurilised tunnused, sealhulgas rohked mikrovillid - mis on eriti silmatorkavad sekretorilistes rakkudes - ja intratsütoplasmasiseste mukiinivakuolide olemasolu. Nendel rakkudel on neoplaasia tunnusjooned, sealhulgas suur kartsinoembrüonaalse antigeeni (CEA) produktsioon ja võime moodustada kasvajaid nii hamstri põsepõskedes kui ka immuunpuudulikkusega hiirtel, mis viitab nende in vivo kasvajapotentsiaalile.

LS180 rakud olid tähelepanuväärsed oma erakordselt suure CEA tootmise poolest, eraldades ligikaudu 900 korda rohkem CEA-d raku kohta kasvukeskkonda ja kandes 30 korda rohkem CEA-d kui teised käärsoolevähi liinid, näiteks HT-29. See muudab LS180 väärtuslikuks mudeliks neoplastilise jämesoole epiteeli biokeemiliste, immunoloogiliste ja funktsionaalsete omaduste uurimiseks, eriti seoses CEA-ga seotud kasvajamarkeritega. Rakkude karyotüübi määramisel on kindlaks tehtud, et nende kromosoomide komplement on ebanormaalne ja vastab neoplastilisele transformatsioonile. Nende epiteeli identiteedi ja kasvajaga seotud tunnuste tõttu sobivad nad kasutamiseks immunoloogilistes analüüsides, ravimite skriiningus ning kolorektaalvähi bioloogia ja ravivastuse uuringutes.

Lisaks on LS180 osa vähirakuliinide entsüklopeediast (CCLE), kus seda on põhjalikult iseloomustatud multioomilise profiilianalüüsi, sealhulgas proteoomika, transkriptoomika ja mutatsiooniandmete abil. LS180 on klassifitseeritud mikrosatelliitide ebastabiilse (MSI) rakuliinina, mis on fenotüüp, mis on seotud hüpermutatsioonilise genoomiga ja mis teadaolevalt mõjutab proteoomi korraldust ja terapeutilist haavatavust. LS180 proteoomiline analüüs näitas, et MSI rakuliinidel, sealhulgas LS180-l, esineb märkimisväärne muteerimise jälgimises ja translatsioonikontrollis osalevate valgukomplekside düsregulatsioon, mis annab ülevaate ravimitundlikkuse ja resistentsuse mehhanismidest. Proteoomilised andmed toetavad veelgi, et LS180-s on valkude ekspressiooni laiaulatuslik kooskõlastamine RNA ekspressioonist lahutatud, rõhutades otseste valgu tasandi uuringute tähtsust.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest