LS180

LS180 je buněčná linie lidského adenokarcinomu tlustého střeva vytvořená z primárního nádoru dospělé pacientky se středně dobře diferencovaným adenokarcinomem tlustého střeva, který metastázoval do perikolické tukové tkáně. Morfologie buněk je epiteliální, mají oválný až polygonální tvar a průměr od 20 do 40 μm. Vykazují ultrastrukturální charakteristiky typické pro normální buňky sliznice tlustého střeva, včetně hojných mikrovilů - zvláště výrazných u sekrečních buněk - a přítomnosti intracytoplazmatických mucinových vakuol. Tyto buňky vykazují charakteristické znaky neoplazie, včetně vysoké produkce karcinoembryonálního antigenu (CEA) a schopnosti tvořit nádory v křeččích lícních váčcích i u imunodeficitních myší, což svědčí o jejich nádorovém potenciálu in vivo.

Buňky LS180 se vyznačovaly výjimečně vysokou produkcí CEA, kdy uvolňovaly přibližně 900krát více CEA na buňku do kultivačního média a nesly 30krát více CEA asociovaného s buňkou než jiné linie karcinomu tlustého střeva, jako je HT-29. To z LS180 činí cenný model pro studium biochemických, imunologických a funkčních vlastností neoplastického epitelu tlustého střeva, zejména ve vztahu k nádorovým markerům asociovaným s CEA. Buňky byly karyotypizovány a bylo potvrzeno, že mají abnormální chromozomální doplňky odpovídající neoplastické transformaci. Jejich epiteliální identita a vlastnosti spojené s nádorem je předurčují k použití v imunologických testech, při screeningu léčiv a ve studiích biologie kolorektálního karcinomu a léčebné odpovědi.

Kromě toho je LS180 součástí encyklopedie nádorových buněčných linií (Cancer Cell Line Encyclopedia, CCLE), kde byla důkladně charakterizována pomocí multiomického profilování zahrnujícího proteomiku, transkriptomiku a mutační data. LS180 je klasifikována jako mikrosatelitně nestabilní (MSI) buněčná linie, což je fenotyp spojený s hypermutovaným genomem a známý tím, že ovlivňuje organizaci proteomu a zranitelnost při léčbě. Proteomická analýza LS180 odhalila, že buněčné linie MSI, včetně LS180, vykazují významnou dysregulaci proteinových komplexů zapojených do sledování mutací a kontroly translace, což nabízí pohled na mechanismy citlivosti a rezistence k lékům. Proteomická data dále potvrzují, že rozsáhlá koordinace exprese proteinů na úrovni drah je u LS180 oddělena od exprese RNA, což podtrhuje význam přímého zkoumání na úrovni proteinů.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení