- Tissue
- Peau
- Disease
- Mélanome
- Metastatic site
- Canal lymphatique thoracique
- Synonyms
- SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1
Documents
SK-MEL-1
Cell line · Product number 300424
This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...
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01General information
- Description
- Cette lignée cellulaire a été établie en 1966 par F. Oettgen et ses collaborateurs à partir de cellules provenant du canal thoracique d’un patient. Elle présente des granules pigmentaires liés à la fois à la synthèse et à la phagocytose. D’après nos résultats de séquençage, d’analyse par immunoblot (WB) et de PCR, cette lignée cellulaire porte une mutation BRAF V600E. Les cellules sont de type sauvage pour le gène N-Ras.
- Tissue
- Peau
- Disease
- Mélanome
- Metastatic site
- Canal lymphatique thoracique
- Synonyms
- SK-Mel-1
- SK Mel 1
- SK-Mel 1
- SK-Mel1
- SKMEL-1
- SkMEL-1
- SKMEL1
- SK 1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Suspension
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Sphérique
- Tumourigenic
- Oui, chez les souris nues. Il provoque des mélanomes malins pigmentés. Il provoque également des tumeurs dans la poche jugale des hamsters traités à la cortisone.
04Identifiers
- Citation
- SK-MEL-1 (numéro de catalogue Cytion 300424)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0068
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- Groupe sanguin A, Rh+. Des anticorps dirigés contre cette lignée ont été détectés chez 63 % des patients atteints d’un mélanome malin et chez 10 % des patients atteints d’autres maladies.
- Isoenzymes
- PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
- Mutational profile
- La mutation BRAF de type V600E a été mise en évidence à l'aide de méthodes basées sur l'ADN (séquençage, RT-PCR) et de méthodes basées sur les protéines (Western blot).
- Products
- Mélanine
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, contenant 2,1 mM de glutamine stable et 2,0 g/L de NaHCO₃ (numéro d'article Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.
- Supplements
- Ajouter au milieu 15 % de sérum fœtal bovin (FBS) inactivé par la chaleur
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Entretenir les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu de culture. Démarrer les cultures à une densité de 5 × 10⁵ cellules/ml et maintenir la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 × 10⁵ et 1 × 10⁶ cellules/ml pour une croissance optimale.
- Seeding density
- 1 à 2 × 10⁵ cellules/mL
- Fluid renewal
- 2 à 3 fois par semaine
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.
Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.
- Freeze medium
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
- Storage conditions
Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.
- Shipping conditions
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donor
- Donor age
- 29 ans
- Ethnicity
- caucasien
09Legal and safety
- Safety precautions
- Lorsqu’on prévoit entreposer un cryotube dans de l’azote liquide en vue d’une décongélation ultérieure, il est impératif de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Le port de gants et de vêtements de protection appropriés est essentiel, et l’utilisation d’un masque facial ou de lunettes de protection est obligatoire lors du transfert d’échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d’azote liquide. Cette précaution vise à réduire le risque de blessure causé par d’éventuelles explosions de cryotubes lors de leur retrait, pouvant entraîner la projection de fragments coupants.
- Warranty
Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.
Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
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