Tartalomra ugrás
SK-MEL-1
Szövet
Bőr
Betegség
Melanoma
Áttétes hely
Mellkasi nyirokcsatorna
Szinonimák
SK-Mel-1, SK Mel 1, SK-Mel 1, SK-Mel1, SKMEL-1, SkMEL-1, SKMEL1, SK 1

Dokumentumok

SK-MEL-1

Cell line · Termékszám 300424

This cell line was established in 1966 by F. Oettgen and associates using cells from the thoracic duct of a patient. Pigment granules relating both to synthe...

€550.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás
Ezt a sejtvonalat 1966-ban F. Oettgen és munkatársai hozták létre egy beteg mellkasi járatából származó sejtek felhasználásával. Mind a szintézishez, mind a fagocitózishoz kapcsolódó pigmentszemcsék jelen vannak. Szekvenálási, WB- és PCR-eredményeink szerint ez a sejtvonal BRAF V600E mutációt hordoz. A sejtek N-Ras vad típusúak.
Szövet
Bőr
Betegség
Melanoma
Áttétes hely
Mellkasi nyirokcsatorna
Szinonimák
  • SK-Mel-1
  • SK Mel 1
  • SK-Mel 1
  • SK-Mel1
  • SKMEL-1
  • SkMEL-1
  • SKMEL1
  • SK 1

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Gömb alakú
Daganatképző
Igen, meztelen egereken. Pigmentált rosszindulatú melanomákat képez. Kortisonnal kezelt hörcsögök pofazacskójában is képez daganatokat

04Azonosítók

Hivatkozás
SK-MEL-1 (Cytion katalógusszám: 300424)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0068

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
A vércsoport, Rh+. A rosszindulatú melanomás betegek 63%-ánál és az egyéb betegségben szenvedő betegek 10%-ánál mutattak ki ellenanyagot ezzel a vonallal szemben.
Izoenzimek
PGM3, 1, PGM1, 1, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1-2, G6PD, B,
Mutációs profil
A V600E típusú BRAF mutációt DNS alapú módszerekkel (szekvenálás, RT-PCR) és fehérje alapú módszerekkel (Western Blot) határozták meg
Termékek
Melanin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820700a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 15% hővel inaktivált FBS-szel egészítsük ki
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
A tenyészeteket a táptalaj rendszeres hozzáadásával vagy cseréjével tartsa fenn. A tenyészeteket 5 x 105 sejt/ml sűrűséggel indítsa el, és az optimális növekedés érdekében tartsa a sejtkoncentrációt 3 x 105 és 1 x 106 sejt/ml közötti tartományban.
Ültetési sűrűség
1–2 x 105 sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
29 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi